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组织学与胚胎学_第1章_绪论
组 织 胚 胎 学 第7版 人民卫生出版社 主讲教师: 张海林 0371 绪 论 一、组织学的研究内容 组织学(histology):研究机体微细结 构及其相关功能的科学。 它是以显微镜观察组织切片为基本方法,又称显微解剖学。 二、内容: 1.基本组织(总论): 2.器官、系统(各论): ?????? 上皮组织 结缔组织 肌组织 神经组织 人体的组成 210 种 Cell 细 胞(cell) 细 胞 外 基 质 (由细胞产生的非细胞物质) 组 织 Tissue 器 官 organ 系 统 人 体 4种组织按一定规 律组合形成器官 上皮组织 Epithelial Tissue 结缔组织 Connective Tissue 肌组织 Muscular Tissue 神经组织 Nervous Tissue 基本组织 形态相似,功能相近的细胞和细胞外基质构成组织 基本单位,新陈代谢、生长发育、繁殖分化的形态基础 三、组织学常用计量单位 1mm=1000μm,1μm=1000 nm 问题 解决方法 观察对象太小 放大 显微镜 观察对象无色,无反差 染色(HE染色) 观察对象生化成分不同 细胞化学、免疫组织化学 观察对象是活体 培养 四、组织学研究技术 (一)一般光学显微镜术 应用一般光学显微镜 观察组织切片 组织切片标本 —载玻片 ———盖玻片 ————组织 研究技术 (light microscope, LM) 长度单位:μm 分辨率:0.2 μm 石蜡切片法(Paraffin sectioning) 1.光学显微镜 技术 : 用显微镜观察组织切片为最常用方法。 标本要求: ? 保持生活状态时的形态结构。 ? 能透光。? 易分辨不同结构 (1) HE染色的石蜡切片制作过程: 固定 脱水 包埋 切片 染色 封片 ? 固定: 保持生活状态时的组织结构和成分。用固定剂如酒精、甲醛、混合固定剂, 通过凝固蛋白或分子间的交联而起固定作用。 二甲苯 酒精 固定液 ? 脱水:上行梯度酒精脱水,防止组织收缩。 自动脱水机 ? 包埋: 自动包埋机 包埋材料: 光镜:石蜡、火棉胶。 电镜:树脂 ? 切片:切5?7?m厚 切片机 Microtome Eosin 伊红 酸性染料(粉红色) 带阴电荷 (—) 碱性物质(+)结合 嗜酸性。 Hematoxylin 苏木精 碱性染料(蓝色) 带阳电荷(+) 带阴电荷(—)物质结合 染成蓝色 嗜碱性。 ? HE 染色: ? 封片: HE染色 苏木精:染色质、核糖体 伊红:细胞质、细胞外基质 封片 HE染色切片标本 皮 肤 卵 巢 (2)其他制片技术:涂片、铺片、磨片等。 磨片 牙和骨等坚硬组织可磨成薄片。 ? 涂片 血细胞和分离培养的细胞可直接涂在玻片上制成。 血涂片 ? 铺片:疏松结缔组织和肠系膜等软组织可撕成薄片铺在玻片上。 铺片 磨 片 银染法:硝酸银、氯化金等重金属盐,其微粒附着在细胞或组织结构表面,而呈棕黑色或棕黄色。 小脑蒲肯野细胞 (3)特殊染色方法:银染法、铁苏木精染色等 (二)电镜技术 (electron microscope,EM) EM的原理和LM相似,但用电子束代替光线,磁场代替玻璃透镜。 (二)电子显微镜术 电子显微镜下才能看到的结构称超微结构。 1.透射电镜: 电子密度高: 电子密度低: 2.扫描电镜: 分辨率:0.2nm 计量单位:nm(纳米)
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