中医基础理论综合实验指导.doc-浙江中医药大学教学网.doc

《中医基础理论》 综合实验指导 浙江中医药大学 基础医学院机能实验室 目 录 1.脾虚证造模实验…………………………………………………3 2.人参浸煎液对小白鼠耐缺氧时间的影响………………………5 3.寒热对血液运行的影响…………………………………………6 4.参附汤固脱救逆作用的观察……………………………………8 5.血瘀证造模实验………………………………………………10 实验一 脾虚证造型实验 [查阅文献] 实验前，让学生充分查阅文献、熟悉中医脾的生理功能和病理变化，以脾主运化，为气血生化之源，脾主升清，脾主四肢，在体合肉等内容为重点，并了解脾虚证造模实验的常用方法。 [实验目的] 1．通过实验前查阅文献，拓展了学生的知识面，并使学生意识到这是进行科研的基础。 2．通过观察脾虚证型动物的症状、体征，并以胃肠推进率和血浆蛋白为客观指标，加深学生对有关脾的中医基础理论的认识。 3．让学生参与整个实验过程，培养了学生的动手能力、创新能力和科学思维能力。提高了学生观察、分析和综合判断水平。 4．理论联系实际，学以致用，有利于学生素质的全面发展和提高。 [实验原理] 根据苦寒损伤脾胃的中医理论，用苦寒泻下药（生大黄）给予动物，造成脾虚证动物模型。脾气虚弱，水谷不运，出现摄食减少、大便溏薄。脾气主升，脾虚气陷，出现内脏下垂、脱肛。气血生化无源，气虚推动无力，出现游泳时间缩短；（阳）气虚失于温煦，出现缩蜷；血虚，皮毛失养而枯槁。四肢和肌肉缺少水谷精微的营养，则行动缓慢、体重下降（消瘦）。 [实验材料] 雄性小白鼠60只，生大黄300g，生理盐水1000ml,血浆总蛋白试剂盒1盒，血浆白蛋白试剂盒1盒，炭末若干，自动生化仪1台，离心机1台，水温恒温箱1台，天平秤2台，玻璃试管20支，卷尺10个，秒表10只，剪刀19把，镊子10把，灌胃针头10个，针筒（1ml）10支等。 [实验方法] 1．取体重28~33g雄性小白鼠60只，随机分为正常组30只和造型组30只。造型组每只以0.2ml/10g生大黄液(水煎，每1ml相当含药材1g)灌胃；每日2次，连续5天。正常组同法灌胃同体积生理盐水。 2．实验结束后，观察记录两组小白鼠的食量、大便、活动、皮毛、体重等情况。 3. 实验结束后，正常组和造型组各取10只小白鼠，放在水池里测游泳时间。 4. 实验结束后，正常组和造型组各取10只，采禁食12h空腹血,在全自动生化仪上测定血浆总蛋白、白蛋白等 5. 胃肠推进率测定 5.1 将造型组鼠与正常组鼠各10只于检测前禁食14h~20h,自由饮水。 5.2 胃肠推进率测定：用含10%炭末的生理盐水按0.2ml/10g剂量灌胃15min后，颈椎脱臼处死，立即剖腹。将消化道自贲门至直肠末端完整摘出，不加牵引，平铺于木板上，测其全长，并记录贲门到炭末前沿的距离，计算其与胃肠道全长的百分比，取各组的均值进行比较。 6. 记录实验结果并逐项分析其原因。 实验二 人参浸煎液对小白鼠耐缺氧时间的影响 [实验目的] 观察元气旺盛或不旺盛的小白鼠在缺氧情况下生存时间的差异，以了解元气在生命活动过程中的重要作用。 [实验原理] 中医理论认为正气的盛衰是机体抗病和康复能力的内在依据，正气强，则抵御外邪和适应恶劣环境的能力就强，反之，正气弱则对恶劣环境的抵御能力就差。 [实验器材] 125ml广口瓶10只，1ml注射器2只，6号注射针头2只，钠石灰2g，100%人参煎液50ml，0.9%生理盐水100ml，秒表1只，纱布若干，18~20g雄性小白鼠10只，天平1台。 [实验步骤] 1、取生晒人参50g，加水150ml，文火煎至50ml，冷却待用； 2、称钠石灰1克每份，共10份，分别包于纱布内，置于广口瓶中； 3、取18~20g雄性小白鼠10只，随机分成2组，一组实验组，另一组为对照组，称好体重，标记编号； 4、将实验组小白鼠腹腔注射人参煎液，剂量为0.1ml/10g，对照组注射等量的生理盐水； 5、待用药半小时后，将小白鼠放入广口瓶内，迅速盖好瓶盖，同时按下秒表； 6、仔细观察小白鼠窒息致死的时间，并作好实验记录，完成实验报告。 [注意事项] 1、把握注射的剂量； 2、药物注射后，必须要到30分钟后方可置于瓶内； 3、腹腔注射时，不能深刺，以免损伤内脏而致动物死亡。 实验三 寒热对血液运行的影响 [实验目的] 用不同温度刺激被试动物，观察在室温及寒热情况下被试动物血液运行的快慢，血管管径的大小及其变化，从而了解机体血运对寒热环境的不同反应，加深对寒热属性的理解。 [实验原理] 人体血液的运行主要由心气的推动来实现，同时，外界环境及