百草枯对人肝HepG2细胞存活力和凋亡的影响.docVIP

百草枯对人肝HepG2细胞存活力和凋亡的影响 　　摘要：探讨百草枯（PQ）对人肝细胞的毒性。采用甲基噻唑蓝试验和流式细胞术分别检测了PQ处理24 h对人肝HepG2细胞存活力和凋亡的影响。PQ处理24 h时，对HepG2细胞存活力的半数抑制浓度为51.17 mg/L；7.21 mg/L的PQ处理24 h即可启动HepG2细胞的早期凋亡程序，随着PQ处理浓度的增大，HepG2细胞的总凋亡率先升高后降低，而细胞坏死率持续升高。PQ对人肝HepG2细胞具有明显毒性，会抑制HepG2细胞的存活力，低浓度时主要诱导细胞凋亡，高浓度则主要导致细胞坏死，说明保肝类药物可能对PQ中毒有较好疗效。 　　关键词：百草枯；HepG2细胞；甲基噻唑蓝试验；流式细胞术；存活力；凋亡 　　中图分类号：R994.6 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2016）12-3088-06 　　DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.12.023 　　Abstract： The cytotoxicity of paraquat （PQ） on human liver was explored comprehensively. Changes of viability and apoptosis were determined respectively by methyltetrazolium assay and flow cytometry in human hepatic HepG2 cells after 24 h PQ treatment. 24 h median inhibitory concentration of viability was 51.17 mg/L in HepG2 cells treated by PQ. Early apoptotic HepG2 cells were observed in 7.21 mg/L PQ treatment group. The total apoptotic rate of HepG2 cells went up at first and went down at last， but the necrotic rate kept a continuous increasing tendency with the increase of PQ treatment concentrations. PQ had a heavy toxicity on human hepatic HepG2 cells， inhibited cell viability， induced mainly cell apoptosis at a low concentration and cell necrosis at a high concentration， and which suggested liver protection drugs were possible to be effective for the treatment after PQ poisoning. 　　Key words： paraquat； HepG2 cell； methyltetrazolium assay； flow cytometry； viability； apoptosis 　　百草枯（Paraquat，PQ）是一种水溶型快速灭生性除草剂，因其易于被土壤吸附、在环境中残留量相对较低和具有良好的除草效果，PQ先后在全球120多个国家60多种作物中被广泛使用[1]。但自1962年注册生产以来，这个使用量在全球仅次于草甘膦的除草剂已经引起了严重的公共健康问题，由PQ导致的生产和使用接触而死亡的事件时有报道[2-4]。 　　通过对PQ中毒病人、死者和试验处理动物进行研究，人们发现体内蓄积的PQ在肺内沉积最多，PQ中毒之后往往首先导致呼吸衰竭[5-7]。此外，肾作为水溶物质的排泄器官，其在PQ中毒之后发生的变化受到人们的广泛关注[8，9]。近年来的慢性毒性试验发现，PQ引起的部分病理特征与一些衰老疾病症状相似，随之PQ的神经毒性被深入探讨[10，11]。但PQ对其他器官的毒性报道较少，至今仍没有针对PQ中毒的良好治疗策略和高效解毒剂[12]，因此人们对PQ的毒性及机制的认识仍不完全。 　　众所周知，肝是机体最重要的解毒器官，肝细胞在外源毒物的降解过程中往往发挥着举足轻重的作用，因此，解读肝细胞在PQ处理后发生的变化对全面理解PQ的毒性效应及机制具有重要意义，有助于寻找新的方法提高肝对PQ的抵抗力、发挥肝对PQ中毒的解除功效，但PQ中毒对人肝细胞的影响并未受到足够的关注。