柱上进样(Oncolumn).ppt

色谱的发展 色谱法分类 GC 系统概论 GC VS LC 两者的差异 应用领域 气 源 高壓氣體鋼瓶 注意使用安全性 氫氣鋼瓶放置在實驗室外 鋼瓶必須加上鏈條固定 注意使用壓力與溫度 必須有清楚標示 氣體產生器 氫氣、氮氣產生器或空氣壓縮機 注意氣體純度問題 必須經常更換氣體過濾器 气体质量控制 过滤系統 氧气的催化 將载气中的氧降至50ppb以下 活性碳过滤重的碳氢化合物 將载气中的碳氢化合物降至0.1ppb以下 分子筛过滤水汽 將载气中的水降至0.1ppb以下 延长色谱柱寿命 保护检测器 指示剂的重要性 指示剂 提供正確的更换讯息 高灵敏度 填充柱进样口 柱上进样(On Column) 快速气化（Flash-vaporization） 柱上进样(On column) 液体样品直接注射进柱头上 消除了气化时样品损失。 消除了传输过程中从进样口到色谱柱之间的样品损失。 可用于热不稳定物质的分析。 定量分析精度好。 最好用于干净稀释的样品。 1041进样口 快速气化（Flash-vaporization） 对于浓度较高或较脏的样品。 色谱柱连接在进样口底部。 色谱柱完全填充。 样品在玻璃内衬中气化 进样口至少高于柱温箱50?C。 能够用于大口径的毛细管。 毛细管进样 只需要少的进样量 需要特别的进样技术－分流/不分流/柱上进样 载气流量小 但检测器需要尾吹 需要特别的硬件 隔垫吹扫 分流装置 压力、流量调节 毛细管柱进样口 要求不同的硬件和技术。 直接进样. 分流/不分流进样. 柱上进样 直接进样 ----(柱上进样或快速气化) 只用于大口径 (? 0.53 mm 内径). 将注射器中的样品全部送入到色谱柱. 允许缓慢注入较大体积的稀释样品 (? 2 μL)。 相对低的进样口温度。 分流进样规则 进样口温度比样品中最高沸点的温度至少高20?C，以便高效且得到好的重现性。 针头不用预热，快速进样，并迅速拔出针头。自动进样器一般为1μL或更少。对高沸点的样品应在进样口停留1-2s. 如果程序升温，柱温箱的温度应该高于溶剂的沸点，进样后应快速升温。 以确保隔垫吹扫打开，设定为2-5 mL/min. 不分流进样的规则 将软件置于不分流模式（splitless）。所有进样口的流量应经过色 谱柱和隔垫吹扫.将进样口温度设置为沸点最高物质的沸点上。 用“三明治”技术慢慢进样。在进样口预热针头0.05 min. 以1.0μL/sec 的速度进样。让注射器停在进样口几秒钟以确保样品完全气化。 开始时，柱温箱温度设定为比溶剂的沸点低20oC，保持1分钟，然后以 30oC/min的速度升到比溶剂沸点高 40-60oC的温度，然后再根据样品 需要程序升温。进样时间为0.5-1.0分钟后，进样口切换到分流模 式。排气流量至少应设为50 mL/min.保证隔垫吹扫打开，并设为2-5 mL/min. 分流/不分流进样 用于毛细管柱0.1 mm to 0.53 mm ID. 可选用分流/不分流进样 (split/splitless.) 分流(split) 允许样品中的代表部分进入到色谱柱中。 当被测物浓度较高时。 不分流(splitless) 类似于直接进样. 样品中绝大部分进入到色谱柱中。 分 流 均匀气化的样品通过分流点(柱尖端Colomn tip). 样品在玻璃衬管气化 要求： 将样品中具有代表性的样品注入到色谱柱中。 可重现的分流比 缺点 可能会有进样歧视现象。对宽沸程的样品易产生非线性分流，使样品失真 不适于高纯度物质和痕量组分(50ppm)的分析 分流比 分流比的设定根据样品的浓度和复杂程度来决定。总流量一般要大于20ml/min 隔垫吹扫： 用途：赶走残留样品和溶剂。 2-5 mL/min的载气直径吹扫隔垫底部。 可用烧结的限制器和针型阀来控制。 在特有的毛细管柱进样口上使用。 1079 进样口 色谱柱材料和结构 填充柱 - 短(2-3 米), 管内径较粗. 毛细管柱 - 长( 60 米), 内径较细. 所有材料均要求化学及热性质稳定. 热稳定性 - 分析时所使用的温度不应致使色谱柱材质受到破坏 化学稳定性 - 在一定温度下，色谱柱材质不受分析物的影响 注意：用色谱级、干净的材料。 毛细管柱 不锈钢 ?玻璃 ? 熔融硅. 柔韧性及机械强度均较好 惰性 内径：0.05 - 0.80 mm . 长度：可大于100 m , 普通一般为30 m。 外层为聚酰亚胺，可修补柱子缺陷并且增加强度。 柱子内表面进行硅烷化处理。 内壁涂有固定相. 色谱柱参数 柱长、内径、涂膜厚度 色谱柱长度 柱长度只有大的变化才会影响分辨率。 填充柱一般为2-3 米. 毛细管柱可以根据需要进行裁剪。 色谱柱内径 填充柱固定为2