专题2-课题1-微生物的实验室培养讲述.ppt

系列稀释操作 101 102 103 104 105 106 注意： 1.移液管需要经过灭菌 2.操作时，试管口和移液管应在离火焰1~2CM处 涂布平板操作 思考 将接种后和未接种（作为对照组）的培养基均放到370C的恒温箱中，培养12～24h后进行观察并记录结果。 涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第2步应如何进行无菌操作？ 答：应从操作的各个环节保证“无菌”。 1.酒精灯与培养皿的距离要合适； 2.吸管头不要接触任何其他物体； 3.要在火焰周围迅速操作。 未接种的培养基在恒温箱中保温1～2 d后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。 如果接种成功的话，在培养基的表面可观察到大小、形状、颜色相似的菌落。 三、结果分析与评价 1、未接种的培养基表面是否有菌落生长？如果有菌落生长，说明了什么？ 2、在接种大肠杆菌的培养基上，能否观察到独立的菌落？它们的大小、形状、颜色相似吗？ 培养12 h与24 h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同。随着时间的延长、菌落的不断生长，使菌落不断增大。 无菌操作未达到要求：可能是培养基灭菌不彻底；可能是接种时发生了污染；也可能是在培养的过程中受到了污染。 3、培养12h和24h后，观察到的实验结果相同吗？如果不同，请分析产生差异的原因？ 4、如果在培养基上观察到不同形态的菌落，请分析其可能的原因。 将菌种接种到试管的固体斜面培养基，放入4℃冰箱中保存。以后每3~6个月，要将菌种转移到新的培养基。 四、课题延伸 3ml甘油瓶中装入1ml甘油后灭菌，再加入1ml菌液，混匀后放入-20℃冷冻箱保存。 1.对于频繁使用的菌种 2.对于需要长期保存的菌种 临时保藏： 甘油管藏： 例2：下列有关细菌培养的叙述，正确的是（ ） A．在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌 B．在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长 C．向液体培养基中通人氧气能促进破伤风杆菌的生长 D．在半固体培养基中接种细菌培养后可以观察其运动 D 例3：某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回答与此实验相关的问题。(1)培养基中含有蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了___________和__________。除此之外，培养基还必须含有的基本成分是__________和_____________。(2)对培养基进行灭菌，应该采用的方法是_______________。(3)为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于__________中培养，培养的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种_________作为对照实验。 氮源 碳源? 无机盐 水 高压蒸汽灭菌 恒温培养箱 无菌水 (4)培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有___________种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越_____________。(5)如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐____________细菌，这种培养基被称为__________。 多 高 盐(或NaCl)? 选择培养基 例4：氯苯化合物是重要的有机化工原料，因其不易降解，会污染环境。某研究小组依照下列实验方案(如图1)筛选出能高效降解氯苯的微生物SP1菌。培养基配方如下表。 (1)配制Ⅱ号固体培养基时，除添加Ⅱ号液体培养基成分外，还应添加______。(2)培养基配制时，灭菌与调pH的先后顺序是_______________。 琼脂 先调pH、后灭菌 (3)从用途上来说，Ⅰ号培养基和Ⅱ号培养基分别属于__________培养基和___________培养基。在Ⅱ号培养基中，为SP1菌提供氮源的成分是___________。 通用 选择 硝酸铵 (4)在营养缺乏或环境恶劣时，SP1的菌体会变成一个圆形的休眠体，这种休眠体被称为____。 (5)将SP1菌接种在含不同浓度氯苯的Ⅲ号培养液中培养，得到生长曲线(如图2)。从图2可知，SP1菌在_____ _培养条件下最早停止生长，其原因是__________。 芽孢 20mg/L氯苯? 碳源最早耗尽 * * 微生物的类群 微生物 原核类: 真核类 非细胞类： 细菌、支原体、放线菌、蓝藻 个体微小、结构简单 酵母菌、霉菌、食用菌 真菌： 原生生物： 藻类、原生动物（如：草履虫、变形虫等） 病毒、类病毒、朊病毒 ◆微生物的共同特点： 微生物基础知识 一、基础知识 （一）培养基 1、概念 人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。 2、培养基的类型和用途 （1）按物