人类巴氏小体观察课件.pptVIP

实验二 人类巴氏小体观察 一、目的 1，掌握人类x小体（巴氏小体）玻片标本制作方法。 2，观察识别巴氏小体形态特征及所在部位，鉴定个体的性别。 二、原理 巴氏小体又称X小体：正常女性，位于间期细胞核中，紧贴核膜内缘，大小约1～1.5 um，呈现三角或椭圆形小体，数量为x染色体数减一。巴氏小体是由于女性两个X染色体中的一个失活形成的。Lyon的剂量补偿学说认为：女性有两个X染色体，但所表达的绝大部分遗传物质与只有1个X染色体的男性是一样多的。这是因为女性的X染色体中只有1个保持活性，而另一个是晚复制的，没有活性。该失活的染色体在形态学上呈异染色体，即DNA螺旋压的很紧，染色深而致密，称之为巴氏小体。 三、实验材料口腔粘膜细胞，显微镜，载玻片，盖玻片，牙签，吸管，固定液（甲醇:冰醋酸＝3:1），生理盐水，苯酚品红染液 四、实验步骤 （1）取材 　受检女性用清水先漱口3次，将口腔内杂物漱出，然后用牙签的钝面刮取口腔颊部黏膜表面上皮细胞，刮取时需稍用力，也可以用另一只手的食指在面颊外顶住稍稍加压。为保证收集到较深层的上皮细胞，应弃去第一次刮取物，而用第二次刮取物。 （2）涂片 将刮取的上皮细胞涂在洁净的载玻片上，平铺成薄层细胞平铺片。 （3）固定 将稍晾干(不宜太干)的标本片放到固定液中固定20分钟，或更长时间。 （４）染色　取出实验材料，用１N盐酸解离２０min。然后滴加卡宝品红两滴染色２０min，待染色液稍干，用细水洗去染液，晾干。 （５）镜检 在高倍镜或油镜下观察（巴氏小体） 在低倍镜下，可见口腔粘膜上皮细胞核为圆形或卵圆形．细胞质不着色；换油镜，选择典型的可计数细胞进一步观察，可计数细胞的判断标准是：核较大、染色清晰、轮廓清楚、无皱褶及缺损，染色质为细丝状或均匀的细粒，核膜周围无细菌污染：在可计数细胞内，仔细寻找X染色质：X染色质的特征是：染色深，轮廓消晰，平凸形、半圆形、扁平形或三角形，大小为1—1.5um． * * *