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动物细胞工程第三课时课件.ppt
* 比较项目 植物组织培养 动物细胞培养 原理 培养基性质 培养基特有成分 培养结果 培养目的 细胞的全能性 细胞增殖 植物组织培养和动物细胞培养的比较 固体培养基 液体培养基 蔗糖 植物激素 葡萄糖 动物血清 植物体 细胞群 快速繁殖、培育无病毒植株 获得细胞或细胞分泌蛋白 归纳: 1.共分成两大阶段:核移植和胚胎移植 2.严格来说新个体有卵巢母细胞的细胞质所以有两个亲本的性状 核移植过程 保证供核不被破坏,使所得个体的性状更符合供体。 例、下图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据此回答: 1)容器A中放置的是动物器官或组织。它一般取自______________________。 (2)容器A中的动物器官或组织首先要进行的处理是 ,然后用 酶处理,这是为了使细胞分散开来,这样做的目的是 。 动物胚胎或幼龄动物 剪碎 胰蛋白 使细胞与培养液充分接触,便于培养 (3)培养首先在B瓶中进行,瓶中的培养基成分有 ________________等。在此瓶中培养一段时间后,有许多细胞衰老死亡,这是培养到第___ 代,到这时的培养称为__ 。 (4)为了把B瓶中的细胞分装到C瓶中,用 处理,然后配置成 ,再分装。 营养、动物血清 10 原代培养 胰蛋白酶 细胞悬液 三、动物细胞融合 1.概念: 动物细胞融合也成细胞杂交,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 融合和形成的具有原来两个或多个细胞遗传物质的单核细胞,称为杂交细胞。 2、原理: 细胞膜的流动性 动物细胞融合 植物体细胞杂交 细胞膜的流动性 胰蛋白酶 物理、化学方法 灭活的病毒 使细胞分散后诱导细胞融合 制备单克隆抗体 细胞膜的流动性细胞的全能性 纤维素酶、果胶酶 物理方法 (离心、振荡、电激) 化学方法(PEG) 去除细胞壁后诱导原生质体融合 获得杂种植株 小鼠的B淋巴细胞 杂交瘤细胞 融合 小鼠的骨髓瘤细胞 克隆 产生大量的杂交瘤细胞,获得大量的单一抗体。 如何筛选出杂交瘤细胞? B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 合成DNA 合成DNA D途径,S途径 D途径 D途径能被一种化合物——氨基喋呤阻断。 B B-B 瘤-瘤 瘤 杂交瘤细胞 骨髓瘤细胞 (只考虑两两融合)培养液中细胞有几种类型?融合细胞几种类型? 在具有筛选作用的培养基上培养 杂交瘤细胞有什么特点? 杂交瘤细胞继承了双亲细胞的遗传特性, 既能产生专一抗体又能无限增殖。 第1次筛选目的:得到杂交瘤细胞(多种) 第2次筛选目的:在杂交瘤细胞中筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞。 单克隆抗体 特异性强,灵敏度高 克隆上述杂交细胞 B淋巴细胞 融合 注射特定抗原蛋白 诊断试剂——最广泛应用 准确、高效、简易、快速 运载药物 (“生物导弹” —单抗导向,药物为弹头) 单克隆抗体的应用 例.下图是单克隆抗体制备过程示意图,据图回答: (1)图中A过程是从小鼠的脾脏中取得_____________细胞,该细胞能够产生_____________。从小鼠体内提取分离该细胞之前,应给小鼠注射_____________类物质。 (2)B过程是一个_____________过程,该过程的进行需要灭活的_____________或_____________的诱导。 (3)单克隆抗体在疾病的诊断、治疗和预防方面,与常规抗体相比,其特点是_________________。 细胞融合 抗原 抗体 浆 特异性强、灵敏度高 聚乙二醇 灭活病毒 反馈形成 * * *
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