变性高效液相色谱技术在单核苷酸多态性研究中的应用.PDFVIP

《生命的化学》 年 卷 期 !技术与方法 $ $ ·!’’ · ， （） 0.@N=)?O BP /=P@ $ $ 文章编号： （ ） !#!$$% $ #!’#$ 变性高效液相色谱技术在单核苷酸多态性研究中的应用 苏智广 张思仲 （四川大学华西医院医学遗传学研究室，成都%!(!） 摘要：人类基因组的单核苷酸多态性（ ）研究已成为后基因组时代最重要的内容和目的之一，随之而来的迫切任 )*+, 务是需要适合于自动化且高通量检测 的技术。变性高效液相色谱（ ）是近几年发展起来的高效、快速筛检 )*+ -.+/0 )*+ 的技术，因其检测)*+ 的高灵敏度、低成本以及全自动化操作等优点而备受关注。 关键词：单核苷酸多态性；变性高效液相色谱；基因分型 中图分类号： 12’ 人类基因组中的变异绝大多数是单个核苷酸的 离柱结合。因此， 片段越长，与固定相的亲和 -*6 置换，称为单核苷酸多态性（ ）。按照 的频 力就越强。所以，在不变性温度条件下，可分离长度 )*+, !8 率估计，在人类基因组中每 ! 9 $ 个核苷酸就有 不同的双链-*6 分子。 一个 ，因此，整个人类基因组（ 7 ）中至 杂合双链 分子的分离 基于（）杂合 )*+ $ 4 : ! ; !4 -*6 ! ［］ ! 少有 ， 万以上的 。 的关联研究，可以 ! ! )*+, )*+ 双链 分子没有纯合双链 分子稳定和（） -*6 -*6 为寻找疾病的病因、阐明患者对药物与治疗手段的 -*6 片段中的部分变性（即解开为单链），使其与固 ［］ 不同反应提供依据 。因此， 研究已成为人类 )*+ 定相的亲和力显著降低，在色谱柱上的保留时间将 基因组计划现阶段最重要的内容和目的之一，同时 显著缩短； 可对杂合双链与纯合双链 分 -.+/0 -*6 也需要适合于自动化且高通量检测)*+ 的技术。 子进行分离。由于-*6 分子中不同碱基对的热稳 理论上，用于检测突变的技术都可用于)*+ 筛 定性不同，即按照 、 、 、 的次序依次降低， A0 6? A? 60 查，但这些方法或是检测灵敏度有限，或是难于自动 所以，在某一特定变性温度下，按照 、 、 、