利用水分胁迫筛选葡萄抗旱砧木范例.doc

利用水分胁迫筛选葡萄抗旱砧木 郭志龙 (镇原县农业技术推广中心，甘肃庆阳 744500；联系人E-mail:429093699@) 以盆栽变叶葡萄、贝达、5BB的一年生扦插苗为试材,通过控水胁迫研究了葡萄叶片的脯氨酸、丙二醛、质膜透性、叶绿素含量的变化。结果表明：土壤相对含水量为85％(ck)、70％、50％、30％条件下，变叶葡萄、贝达、5BB叶片的脯氨酸、丙二醛含量、质膜透性随着土壤水分的减少而增加，叶绿素含量随着干旱程度的加重而减少。通过综合生理指标分析：变叶葡萄抗旱性较强，贝达和5BB耐旱性较弱。 Vitaceae）葡萄属（Vitis Linn）植物，是一种栽培价值很高的果树。葡萄在世界果树生产中栽培面积和产量仅次于柑橘，在国际果树生产中占有重要地位[1]。由于葡萄的适应性强、分布广、产量高、营养丰富，有很高的经济价值，所以需要更多的品种来适应不同的环境和地域。 葡萄是世界第三大果树树种，是果品及其加工产品中效益最高的大宗果品之一。冬春多雨夏季干燥的地中海式气候是最有利于葡萄营养生长和品质发育的生态条件，尽管葡萄是一个比较耐旱的果树树种，但夏季频发的干旱高温也常威胁到葡萄的正常生长，而我国葡萄主产区以干旱半干旱气候为主，大陆性季风气候不但导致常年冬春干旱，夏季高温干旱或秋旱也时常发生，西北大多数地区干旱、少雨、空气干燥，水分胁迫使葡萄生长发育产生生理障碍, 降低葡萄产量，影响葡萄浆果品质及葡萄酒品质，是制约葡萄与葡萄酒产业发展的重要环境因子[2-6]。有关水分胁迫对果树[3,4,7-12]光合作用的影响均有很多。旱作栽培技术虽然在一定程度上能够在部分旱区进行葡萄的生产，但土壤水分是优质、丰产栽培的基本保障，在干旱或水分不足地区筛选种植较耐旱的品种，配合旱作栽培技术，对于调整旱区农业种植结构、农民增收具有重要的经济和生态意义。 试验研究对变叶葡萄、贝达、5BB三种抗旱砧木进行盆栽，通过水分胁迫过程中葡萄叶片的脯氨酸、丙二醛、质膜透性、叶绿素含量的变化，以探讨水分对不同抗旱砧木的生理影响，进而为葡萄抗旱栽培提供理论依据。 1 材料与方法 1.1 材料 试验材料为变叶葡萄、贝达、5BB三种抗旱砧木的一年生扦插苗，盆直径44 cm,高32 cm。3月下旬每盆装配土(表土:沙子=1:2)24 kg，每盆扦插3株。每个砧木栽15盆于甘肃农业大学的现代温室中，栽植后管理条件一致，正常浇水，以保证各盆土壤水分状况一致或相近。待苗木长到7-8片叶时，每个砧木选取12盆进行水分胁迫处理。 1.2 方法 1.2.1 水分胁迫采用定量控制浇水的方法，用称重法控制土壤相对含水量[13] 土壤相对含水量(SRWC)是占田间最大持水量的百分数。最大持水量的标定是傍晚时浇水，当水从盆底流出时停止浇水，然后晾一夜，次日上午用烘干法测定土壤含水量，以此时测定的土壤相对含水量作为100％。试验中每天对盆栽苗进行称重获得日失水量，用以补充调节水分[14]。 SRWC(％)＝(土壤重量－土壤干重)/(土壤饱和重量－土壤干重)。 1.2.2 干旱处理分为3种 轻度水分胁迫SRWC为70％；中度水分胁迫SRWC为50％；严重水分胁迫SRWC为30％；CK正常浇水SRWC为85％。处理以盆为对象，每个砧木处理各重复3次。水分胁迫10d后，采集各砧木不同处理的盆栽苗基部以上第4叶片，进行脯氨酸、质膜透性、丙二醛、叶绿素含量四项生理指标的测定。 1.2.3 脯氨酸（Pro）含量的测定 取7支具塞试管按表一加入各试剂，混均后加玻璃球塞，在沸水中加热40min，取出冷却后向各管中加入5ml甲苯充分振荡，以萃取红色物质，待静置分层后吸取甲苯层一“0”管为对照在波长520nm下比色。以消光值为纵坐标，脯氨酸含量为横坐标绘制标准曲线，球线性回归方程。 各称取剪碎的葡萄砧木叶片0.5g，分别置于大试管中，重复三次，加入5ml3%磺基水杨酸溶液，管口加盖玻璃球于沸水浴中浸提10min。然后取出试管待冷却到室温后，吸取上清液2ml，加2ml冰乙酸和3ml2.5%酸性茚三酮显色液雨沸水浴中加热40min，取出冷却后向各管中加入5ml甲苯充分振荡，以萃取红色物质，待静置分层后吸取甲苯层一“0”管为对照在波长520nm下比色。 从标准曲线中查出测定液中脯氨酸浓度，按下式计算样品中脯氨酸的含量。 脯氨酸(ug/g)=(c*v/a)/w 式中：c-提取液中脯氨酸浓度(ug)，由标准曲线求得；v-提取液总体积(ml)；a-测定时所吸取的体积(ml)；w-样品重。 表一 各试管中试剂加入量 管号 0 1 2 3 4 5 6 标准脯氨酸含量（ml） 0 0.2 0.4 0