1-2蛋白程序.doc

蛋白质 1.功能（了解） a.催化（酶） b.结构（膜蛋白）c.运动收缩（肌肉） d.运输（血红蛋白） e.代谢调节 f.其他 2.化学组成 （1）基本单位 20种氨基酸 （2）元素 主要元素：C、H、O、S、N 次要元素：P、Fe、Zn等 ▲例1（09年5）凯氏定氮法的原理是什么？紫外吸收法测蛋白质含量的原理是什么？ 解析：（1）凯氏定氮法是根据蛋白质中的N的平均含量为16%这一特征来测定蛋白质的含量：蛋白质的含量=蛋白N×6.25, （2）蛋白质中，Phe、Tyr、Trp因苯环中含共轭双键，使蛋白质对有紫外吸收的性质，吸收峰在280nm处，吸收度与蛋白的含量成正比，利用一定波长下，蛋白溶液的光吸收值与蛋白含量成正比的关系，进行蛋白含量的测定。 3.分类 (1)按化学组成：简单蛋白（水解仅产生氨基酸）、复杂蛋白 （2）按外形：球状蛋白（酶、抗体）、纤维状蛋白（原肌球蛋白、α-角蛋白、胶原蛋白） （3）按功能：酶、运输蛋白、结构蛋白、储存蛋白等 ▲例2（08年判断）角蛋白是纤维蛋白（+） 解析：记住常见蛋白分类 4.结构（多名词解释） （1）一级结构（10） 氨基酸的种类、排列顺序及连接方式，又称为共价结构或化学结构 ★（2）二级结构（20） 选择、判断、名词 一级结构的基础上，按照一定的方式，有规律的旋转或折叠而形成的空间构像。 分类：⑴α-螺旋：其结构特征为：①主链骨架围绕中心轴盘绕形成右手螺旋；②螺旋每上升一圈是3.6个氨基酸残基，螺距为0.54nm；③ 相邻螺旋圈之间形成许多氢键；④ 侧链基团位于螺旋的外侧。 影响α-螺旋形成的因素主要是：① 存在侧链基团较大的氨基酸残基（空间位阻）；② 连续存在带相同电荷的氨基酸残基（排斥）；③ 存在脯氨酸残基（会使螺旋中断，产生结节） ⑵β-折叠：其结构特征为：① 若干条肽链或肽段平行或反平行排列成片；② 所有肽键的C=O和N—H形成链间氢键；③侧链基团分别交替位于片层的上、下方。 ⑶β-转角：多肽链180°回折部分，通常由四个氨基酸残基构成，借1、4残基之间形成氢键维系。 ⑷无规卷曲：主链骨架无规律盘绕的部分。 (3)超二级结构、结构域 a超二级结构:若干相邻的二级结构中的构像单元彼此相互作用，形成有规则的，在空间上能辨认的二级结构组合体，充当三级结构构件。包括：αα组合、ββ组合、βαβ组合 b结构域：多肽链在二级结构或超二级结构的基础上形成三级结构的局部折叠区，是相对独立的紧密球状实体，是球状蛋白的独立折叠单位。包括：全α结构、全β结构、αβ结构、富含金属或二硫键的结构 （4）三级结构（30） 定义：在二级结构的基础上，按照一定的方式进一步排列成的三维构像 作用力：二硫键、疏水作用力、氢键、静电离子键、范德华力 （5）四级结构（40） 亚基（subunit）:由两个或两个以上的二级结构单元缔合而成的球状蛋白称为寡聚蛋白，其中每一个三级结构单元称为一个亚基或一个亚单元。 5.结构与功能的关系 （1）一级结构决定高级结构 ▲例3（96年1）举例说明蛋白质三级结构决定于它的氨基酸序列 解析：a生理条件下，蛋白质的一级结构决定高级结构；b牛胰核糖核苷酶的二硫键被还原，肽链松散后，经适当的条件，使肽链二硫键重新配对，此时肽链仍具有生物活性的天然构像；c蛋白工程实验证明，肽链中的某些氨基酸突变可以引起突变蛋白质构像的改变 （2）一级结构与生物功能 镰刀状细胞贫血病与血红蛋白（Hb）：血红蛋白β链第6位Glu突变成Val (3)高级结构与生物功能 肌红蛋白（Mb）：储存和分配氧、氧结合曲线为双曲线、由一条多肽链和一个辅基血红素组成 血红蛋白：结合并转运氧、氧结合曲线为S型、由2条α和2条β链组成、存在别构同促效应 6.一级结构测定（详见课本上册168）选择、判断、大题 ⑴N端分析法：FDNB（Sanger）、PITC（Edman）、DNS-Cl（丹磺酰氯）、氨肽酶法 ⑵C端分析法：羧肽酶法、无水肼解法 ※羧肽酶A：不能水解C端为Lys、Arg、Pro的肽键；羧肽酶B：能水解C端为Lys、Arg的肽键；C端倒数第二位是Pro时，A、B都不能水解 ⑶打开二硫键：还原法（巯基化合物，碘乙酸保护）、氧化法（过甲酸） ⑷专一切断：胰蛋白酶（Lys、Arg-COOH肽键）；CNBr（Met-COOH肽键）；胰凝乳蛋白酶(Tyr、Trp、Phe等羧基形成的肽键)； ▲例4 （97年1）用什么试剂可将胰岛素链之间的二硫键打开与还原？如果要打开牛胰核糖核酸酶链内的二硫键，则在反应体系中还需要加入什么试剂？蛋白质变性时，为防止生成的－ＳＨ基重新被氧化，可加入什么试剂来保护？要测定蛋白质二硫键的位置，需用什么方法？ ▲例5（01年1）蛋白质化学测序法的原则和程序