临床微生物学检查的合理开展与应用.ppt

大多数菌血症是由需氧和兼性厌氧菌引起的，他们在需氧瓶中生长的更好。此外，致病性酵母菌几乎无例外的在需氧瓶中生长，还严格需氧菌：假单胞菌和窄食单胞菌。 * 真菌菌血症：酵母菌主要包括白色、光滑、热带、近平滑念珠菌、新型隐球菌；双相真菌包括荚膜组织胞浆菌（最常见）、牙生菌和球胞子菌属；丝状真菌：镰刀霉和足放线病菌属（最常见） * 微生物学检测过程—分析中-培养法 黑曲霉 构巢曲霉 微生物学检测过程—分析中-培养法 金黄色葡萄球菌 微生物学检测过程—分析中-培养法 弧 菌 微生物学检测过程—分析中-培养法 VITEK-2自动化细菌鉴定和药敏仪 微生物学检测过程—分析中-培养法 K-B法 微量肉汤稀释法 琼脂稀释法 E-test法 内容提要 实验室管理模式转变 微生物学检测的临床指征 微生物学检测过程 微生物学检测结果的解读 细菌耐药 血培养 微生物学检测结果的解读 诊断重要性 阳性结果：确定病原+优化抗菌药物治疗 预后重要性 血培养分离到的病原菌：表明宿主原发感染部位的抵抗力下降或机体不能清除病原菌或根除感染灶。 分离的病原菌种类，对预后有重要意义。 血培养——几个定义 微生物学检测结果的解读 菌血症：血流中出现细菌。 注意：分离自血液的细菌可能是败血症的原因，也可能不是或是污染菌。 贯穿性菌血症：用抗菌药物治疗后仍持续存在的菌血症。 注释1：早发贯穿性菌血症通常是由于不适当或不充足的抗菌药物治疗导致； 注释2：晚发贯穿性菌血症通常是由于病灶（如脓肿）没有彻底引流 败血症：由感染引起的全身炎症反应综合征。 败血症事件：不管是败血症、严重败血症或感染性休克，都必须进行血培养。 注释：根据血培养有无得到细菌，来决定败血症、严重败血症或感染性休克。 全身炎症反应综合征（SIRS） 血培养——时间 微生物学检测结果的解读 实际临床操作：血培养应该立即进行（或短时间内） 实验数据表明：细菌进入血流时间是在间歇热发生前大约1h。 通常每30-60min进行一次血培养。但Li等研究表明：血标本抽取后立即或间隔24h再进行培养是没有区别的 Thompson等观察到血培养的阳性率与病人发热波峰并不相关。 血培养——次数 微生物学检测结果的解读 推荐：每次血流感染事件进行2-3次血培养。 注1：血培养后2-5天不必重复进行。 注2：重症监护、移植或血管内置导管，或经验性治疗的患者，提倡使用监测性血培养作为早期败血症检测指标。 注3：大多数具有细菌血症或真菌血症患者进行随访，并不需要再次进行血培养来证明血流感染是否清除。（例外：感染性心内膜炎患者；具有金葡菌血症的非感染性心内膜炎患者，在48-96h血培养再次阳性，有力预测存在复杂性金葡菌血症） 血培养次数 1次阳性率 2次阳性率 3次阳性率 1975年Washington 80例（20ml） 80% 88% 99% 1983年Weinstein等 282例（15ml） 91% 99% (281/282) / 2004年Cockerill 163例（20ml）不含感染心内膜炎患者 65% 80% 96% 研究表明：感染心内膜炎患者 90% 血培养——血量、血量分布和采集 微生物学检测结果的解读 血量 血量分布 成人 每次血培养（每次静脉穿刺）推荐20-30ml 配对需氧和厌氧血培养瓶 注：抽血量少于推荐量，优先接种到需氧瓶中 婴幼儿 抽血量不超过患者总血量1% 24h内收集2-3瓶 推荐需氧瓶 注：厌氧培养仅限母亲有高风险因素的新生儿：分娩时延迟破膜、绒毛膜羊膜炎、慢性口或鼻窦炎、蜂窝组织炎等 采集严格执行无菌操作（含碘的消毒剂需要足够的时间消毒表面，碘酒需要30s），推荐采集静脉血。 血培养——培养方法 微生物学检测结果的解读 传统肉汤培养法 双相培养 裂解-离心：用于真菌和分枝杆菌培养 血培养—三级报告制度 标本核收、信息录入 血培养瓶标记 上机、振荡培养 血培养阳性 血培养阴性 细菌涂片 电话联系主管医生 转种 3天培养后发中间报告：“72h培养阴性” 7天培养后仍为阴性 盲传培养为阴性，发最终报告：“血培养未生长” 鉴定、药敏 微生物学检测结果的解读 必要时 血培养初级报告：革兰染色结果 血培养二级报告：初步药敏纸片法结果 微生物学检测结果的解读 呼吸道标本检测 标准报告单内容 痰标本质量的实验室评价 正常菌群的菌属、菌量（半定量） 致病菌的种属、菌量及药敏 实验室建议 “无致病菌生长” “普通培养未生长” 微生物学检测结果的解读 分级 ⅹ100镜下1个视野中的细胞数和白细胞数 扁平上皮细胞 白细胞 A ＜１０ ＞２５ B 10—２５ ＞２５ C ＞２５ ＜１０ 微生物学检测结果的解读 国外 微生物学检测结果的解读 Gekle