吉林大学发光免疫分析法概要.ppt

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 夹心法：（检查大分子抗原多采用） Sp-Ab+Ag?Sp-Ab-Ag Sp-Ab-Ag+Ab-L?Sp-Ab-Ag-Ab—启动发光试剂———?hv 其中:L为发光标记物或发光底物, Ag为抗原, Ab为抗体, Sp为固相。 ACS 180 由德国拜耳公司生产，商品名为ACS 180全自动化学发光免疫分析系统有ACS 180Plus和ACS 180sE等型号,2000年又推出新—代的ADVIACentaur免疫测定系统 吖啶酯可通过化学反应直接标记抗体或抗原当在碱性介质中氧化时，经过一个二氧酮的中间体，产生一个电激发的10一甲基吖啶酮，当它回复到基态时释放出光子 模块化组合分析系统E Elesys (1010 2010 E-170) 瑞士罗氏公司(Roche)的Elecsys ECLIA系统，综合了各种先进技术，具有独特的优越性，是目前在医学检验中应用的唯一的电化学发光免疫测定仪器 这三台检测系统均应用了电化学发光免疫测定及有关先进技术，其测试的灵敏度和特异性相同，有完善的使用说明，试剂通用，操作也有相同之处。仪器设计上有一些差异，主要不同在于工作量的差别 3 化学生物发光免疫分析法的特点 （1）优点： 高灵敏度 宽的线性范围 分析速度快 高选择性 高稳定性 花费少 所用试剂无毒 消除放射性同位素的污染。 （2）缺点： 实验结果的重复性方面存在一定问题 发光免疫测定是一种瞬时的化学反应 免疫反应中各种因素的干扰 氧化反应中各种因素的干扰 对催化反应原理有的还不十分清楚，对实验的反应条件不易控制，干扰现象不易估计和说明。 （3）必威体育精装版进展 a．多分析物系统的发展 b．流动注射分析在发光免疫分析中的应 用，使分析速度加快，适用于大量样 品的测定。 c．由于发光仪的商业化，刺激了化学发 光免疫分析的常规临床应用的发展。 * * * * * * * * * * * * * * * * * * 发光免疫分析法Luminescence Immunoassay / 一．概论 免疫性是动物在长期进化过程中逐渐发展起来的防御感染和维护机体完整性的十分有效而灵巧的手段。 免疫系统的特殊功能是识别“自我”和“非自我”的物质，对自身的物质不起反应，而对外源的及体内改变了的物质则能起专一的免疫反应，排除其对机体的危害。另一方面，免疫系统还担负着维持机体免疫状态的自身稳定性，以清除体内衰老和突变的细胞。 1．抗体和抗原（Antigen , Antibody） 免疫学的重要对象是抗原和抗体的反应问题。 抗原是一种外来物质，当其进入动物体内能引起抗体的产生，并能和抗体反应的物质。 抗体 (antibody . Ab) 与抗原 (antigen . Ag) 的结合具有极高的专一性和亲合性。 不能诱导产生抗体，但能和适当抗体起反应，即有免疫反应性的简单分子称为半抗原。 ? （1）抗原 蛋白质，多糖，核酸，合成多肽，低分子物质 （2）抗体 抗体是一种蛋白质（主要是γ-球蛋白质） 血清蛋白质在自由电泳场中 白蛋白 α-球蛋白 β-球蛋白 γ-球蛋白 抗体存在于β -球蛋白和γ -球蛋白内 这些蛋白质称为免疫球蛋白 IgM . IgA . IgG . IgD和IgE γM .γA.γG.γD.γE 2. 放射性免疫分析（RIA） 1959 Berson和Yallow 将免疫反应与分析化学相结合创立了放射性免疫分析法。 荷尔蒙的测定 先将荷尔蒙注入天竺鼠体内 对抗此抗原的抗体（Ab） Ag* + Ab === Ag*-Ab 要测定一病人的血清标本中荷尔蒙的浓度， Ag + Ag*-Ab === Ag-Ab + Ag* ( + Ag*-Ab ) 测定Ag*，可计算标本中所含有的荷尔蒙（Ag）浓度 1977 获诺贝尔医学生物学奖 分析对象： 测量含量很低的生物活性化合物： 如蛋白质（酶，接受体，抗体） 激素（甾族化合物，甲状腺激素，酞激素） 药物及微生物等。 优