实验三、减数分裂制片技术及显微观察概要.ppt

实验三 减数分裂制片技术及显微观察 一、实验目的 1 学习生殖细胞的制片技术，观察减数分裂过程中不同时期的染色体形态； 2 了解动植物生殖细胞形成过程中染色体的动态变化，明确遗传的细胞学基础。 第一次分裂：前期Ⅰ：可分为以下五个时期：1）细线期：核内染色体呈细长线状，互相缠绕，难以辨别成双的染色体。2）偶线期：同源染色体相互纵向靠拢配对，称为联会。这样联会了的一对同源染色体，称为二价体。偶线期所表现的这一特征的时间很短，一般难以观察到。3）粗线期：配对后的染色体逐渐缩短变粗，含有两条姐妹染色单体，这样一个二价体包含了四条染色单体，故又称为四合体。在此期间各同源染色体的非姐妹染色单体间可能发生片段交换。4）双线期：各对同源染色体开始分开，由于在粗线期非姐妹染色单体之间发生了交换，因而同源染色体在一定区段间出现交叉，此期可清楚地观察到交叉现象。5）终变期：染色体更为浓缩粗短，交叉结向二价体的两端移动，核仁和核膜开始消失。此时各二价体分散在核内，适于计数染色体的数目。 第一次分裂：中期Ⅰ：核仁和核膜消失，所有二价体排列在赤道板两侧，细胞质里出现纺锤体，每个二价体的两条染色单体的着丝点分别趋向纺锤体的两极，此时最适chr计数、观察形态特征。 后期Ⅰ：二价体中的一对同源染色体开始分开。在纺锤体的作用下分别向两极移动，完成染色体数目的减半过程。此期，同源染色体的两个成员必然分离，非同源染色体间的各个成员以同等机会随机结合，分别移向两极。注意此时染色体的着丝点尚未分裂，每条染色体含有两条染色单体。 末期Ⅰ：染色体移到两极，松开变细，核仁核膜重新出现，形成两个子核。细胞质分裂，在赤道板处形成细胞板，成为二价体。 第二次分裂：前期Ⅱ：染色体又开始明显缩短，而其包含的两条染色单体分得很开，只是着丝点仍然没有分裂。中期Ⅱ：染色体整齐地排列在分裂细胞的赤道板上，出现纺锤体。后期Ⅱ：染色体的着丝点分裂为二，两条姐妹染色单体在纺锤体的牵引下分别移向两极。末期Ⅱ：染色体分别到两极后，又重新出现核仁和核膜，同时细胞质分裂为二，从而使一个母细胞分裂为四个子细胞，称为四分体（四分孢子），每个子细胞内只含有原来母细胞的半数的染色体（n）。 植物花粉减数分裂图1 植物花粉减数分裂图2 三、实验材料 雄蝗虫精巢 四、实验仪器及用具 多媒体显微演示系统、显微镜、电子天平、酒精灯、载玻片、盖玻片、镊子、刀片、吸水纸、解剖针 五、药品和试剂 苯酚品红染液，卡诺氏固定液（同实验一），70％乙醇 六、实验步骤 蝗虫精巢的观察： 1 采集 活的雄蝗虫→固定→去掉第一对步足及翅→剪去背部的胸腹几丁质皮，见到黄色的团状物为脂肪，其内便是栉比排列的精巢小管。精巢小管的上皮为扁平上皮细胞，呈片状； 或者用镊子夹住雄虫的尾位，往外拉，可见精巢：一团黄色组织块，剔除精巢上的其它组织，放到卡诺固定液中固定1.5－2小时，再放入70%酒精溶液保存。 2 用解剖针从精巢上挑取几条丝状物（精细管）放在载玻片，加1－2滴改良苯酚品红，染色10分钟以上。 3 压片：加一滴染液，压片。 4、显微镜观察： 一个精原细胞经过生长期成为初级精母细胞，再经过两次成熟分裂产生四个精细胞。精细胞与一般间期细胞相似，但体积较小，核较大。再经过变形期形成精子，精子可分为头、中段和尾三部分 （注：变形期精细胞→精子的变化过程是从圆形→椭圆形→梭形→丝状）。 头部——着色较深，主要为细胞核，外围一层极薄的细胞质，接近成熟的精子头部呈纺锤形或长纺锤形，完全成熟的精子头部呈针形。 中段——头部下方一个极短的区域，其中含有中心粒，完全成熟的精子中，中心粒不明显。 尾部——中段之后一条纤细的鞭毛状尾，起运动器的作用。 观察要点 细线期、偶线期不易见到，前期I有核仁、核膜，核仁亮。 粗线期同源染色体已经配对，可以观察到具有螺旋结构的11个不同的二价体。X染色体为短棒状。 双线期可见交叉染色体，呈墨迹状，但较细。 终变期洇墨迹明显，边缘不光滑。从边缘起毛刷状，可以成堆。X染色体为单价体。 中期I染色体边缘光滑，进一步短粗。单价体落后，随机到一极去（为X染色体）。其它以四分体为单位排列到赤道板上。 后期I、末期I染色体距离比较远，遥遥相对，但同在一个细胞里。 中期II染色体呈菊花状。 后期II染色体呈四堆。 七、实验作业 1. 制作具减数分裂图象的细胞学片子至少2 张。 2. 绘制精原细胞的分裂相2个。 实验报告 封面 实验名称 一 实验目的 二 实验材料 三 实验简要操作步骤 四 实验结果 五 讨论 * * 二、实验原理 减数分裂是生物在性母细胞成熟形成配子过程中发生的