实验二、静脉注射氨茶碱血药浓度及药动学参数的检测概要.ppt

生物药剂学与药物动力学实验课件 实验二 静脉注射氨茶碱血药浓度测定及药动学参数的计算 生物药剂学与药物动力学实验课件 一、实验目的: 1.掌握紫外双波长法测定氨茶碱血药浓度的方法； 2.熟悉家兔耳缘静脉注射给药后药动学处理原理和方法； 3.熟悉血清中药物提取方法及双波长测定法在血药浓度测定中的应用。 生物药剂学与药物动力学实验课件 二、基本原理 1.氨茶碱 氨茶碱又名茶碱乙烯双胺，由茶碱与乙二胺缩合而成，氨茶碱能抑制体内磷酸二酪酶，减慢环磷酸腺苷（cAMP）的分解速度，从而增加其在细胞内的含量，促使支气管平滑肌舒张，有扩张胆管、冠状动脉作用；减少肾小管对电解质的再吸收而呈现强心利尿作用，一般应用于支气管哮喘、胆绞痛、心绞痛等。 2. 静脉注射药物动力学 氨茶碱经静脉进入血液，随血液循环进行组织分布，达到平衡后转入消除相。血药浓度-时间曲线呈二室药物动力学模型。 3. 氨茶碱血药浓度的测定 双波长法测定原理：在酸性条件下，可用有机溶剂从血清中提取出茶碱，并同时沉淀血清蛋白，再用碱液将茶碱从有机溶剂中提出，然后采用双波长法进行紫外测定，即测定λ274和λ298处的吸光度（ λ274为茶碱和本底，即溶剂、血清的吸收， λ298为本底的吸收 ），△A= λ274 - λ298 ，可根据标准曲线进行浓度换算。 生物药剂学与药物动力学实验课件 生物药剂学与药物动力学实验课件 家兔耳缘静脉注射氨茶碱 家兔耳缘血管分布 生物药剂学与药物动力学实验课件 二室药物动力学模型： Xc Xp X0 K10 K12 K21 X0：静脉注射给药剂量； Xc：中央室的药量； Xp：周边室的药量； K10：药物从中央室消除的一级速率常数； K12：药物从中央室向周边室转运的一级速率常数； K21：药物从周边室向中央室转运的一级速率常数； lgC t 分布相 消除相 药物动力学公式： dxc/dt = K21*Xp – K12*Xc – K10*Xc dxp/dt = K12*Xc – K21*Xp 利用消除相残数法求算相关药物动力学参数。 生物药剂学与药物动力学实验课件 所用材料 日本大耳白或新西兰兔 兔子固定器 婴儿称 1.5 ml EP管 其它:1 ml注射器,1.5 ml EP管离心机,漩涡振荡器,离心机,紫外检测仪,10 ml离心管,三氯醋酸,氢氧化钠,等. 氨茶碱注射液 生物药剂学与药物动力学实验课件 三、实验操作 1.氨茶碱标准曲线的绘制： 取5支0.5 ml空白家兔血清，分别加入氨茶碱注射液（2.5 mg/2 ml）使其浓度分别达到 0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 ml，加0.1mol/L盐酸0.2ml、5%异丙醇氯仿液（抽提液）5ml，蜗旋混合后，3000r/min离心10min。吸取下层氯仿液4 ml至另一试管中，加入0.1mol/L NaOH溶液4ml，蜗旋混合后、3000r/min，离心10min。吸取上层碱液，以0.1mol/NaOH溶液做参比，测定其在λ274和λ298的吸收度（ A274和A298 ），计算△A，以茶碱浓度为横坐标， △A为纵坐标描点绘图，用Excel软件求直线回归方程和相关系数。 2.静脉注射氨茶碱和血药浓度的测定 ①取体重2.5~3.0kg健康雄性家兔1只，于耳缘静脉（外侧）注射氨茶碱10mg/kg（2min内注完），另一耳用锐利刀片切割耳缘静脉取血。分别在给氨茶碱后5、10、20、30、60、120、180 min取血约1.5ml，室温下静置60 min。 ②分离血清：等EP管中血液凝固后，10000 r/min离心15 s分离血清，各管均取血清0.5ml于10ml试管中，加0.1mol/L盐酸0.2ml、5%异丙醇氯仿液（抽提液）5ml，蜗旋混合后，3000r/min离心10min。 ③吸取下层氯仿液4 ml至另一试管中，加入0.1mol/L NaOH溶液4ml，蜗旋混合后、3000r/min，离心10min。 ④吸取上层碱液，以0.1mol/NaOH溶液做参比，测定其在λ274和λ298的吸收度（ A274和A298 ），计算△A。 ⑤将测得血清样品的△A代入标准曲线的方程，求得相应的C，C×10即为茶碱的血药浓度。以时间（T）为横坐标，浓度对数（logC）为纵坐标，进行相应的药动学数据处理。 生物药剂学与药物动力学实验课件 3.药动学参数的计算 作时间t-浓度C-lgC表，画lgC – t图，求算Vc、K21、K10、K12（按课本P229例1处理）。 4. 本实验3人一组 每组进行家兔耳缘静脉给药及家兔氨茶碱血药浓度药物动力学数据的计算。 四、实验结果： 生物药剂学与药物动力学实验课件 T (min) 5 10 20 30 60 120 180