丹皮酚和人血清白蛋白的相互作用研究.pdf

第28卷，第10期 光谱学与光谱分析 2oo and 0ctober。2008 8年1o月 SpectmscopySpectralAnalysis 丹皮酚和人血清白蛋白的相互作用研究 张雅珩2，李加忠2，任翠领2，王小茹2，盛芬玲2，陈兴国1’2 1．兰州大学功能有机分子化学国家霞点实验室，甘肃兰州 730000 2．兰州大学化学化工学院，甘肃兰州730000 摘要通过荧光光谱、紫外光谱、傅里叶红外光谱、圆二色谱及分子模拟技术研究了丹皮酚与人血清白蛋 白的相互作用。在模拟生理条件下，丹皮酚与人血清白蛋白在296，303和310K下的结合常数分别为2．176 ×104，1．963×104和1．777×104m01．L-1；通过圆二色谱及傅里叶红外光谱的数据对由丹皮酚引起的人 血清白蛋白二级结构的改变进行了定性、定量分析；该反应的△F与△S。分别为一11．05kJ·mol-1和 45．70 J·rnorl·K～，表明丹皮酚主要以疏水性作用力与人血清白蛋白相结合；竞争实验与分子模拟的结 果表明丹皮酚主要键合在人血清白蛋白的位点Ⅱ上。 关键词丹皮酚；人血清白蛋白；分子模拟；光谱法 中图分类号：0657．3文献标识码：A 文章编号：1000∞593(2008)10-0325一02 648 cnl_1，而酰胺Ⅱ带则由1 556咖一， 丹皮酚(Pae6nol，2一羟基一4一甲氧基苯乙酮)是牡丹皮及芍到了1 546移动到1 药中的一种常见组分，具有多种生理和药理活性。本文通过 说明丹皮酚与HSA的相互作用使HsA的二级结构发生了 荧光光谱、紫外光谱、傅里叶红外光谱、圆二色谱及分子模 变化，丹皮酚可能与蛋白质肽链中的C_一O或C_一N和 拟技术深入详细的研究了丹皮酚与人血清白蛋白(HSA)的 N—H基团发生了键合，形成了氢键。丹皮酚和HSA形成复 相互作用，并获得二者的结合常数，结合位点数，主要作用 合物可能导致肽链上G一0氢键网络的重排，最终引起『 力类型，蛋白质二级结构变化，结合位点等重要参数。 螺旋结构的变化。根据酰胺I带曲线拟合结果计算了HSA 在生理条件(pH7．4)下，激发波长(A。；)为280nrn时， 与丹皮酚作用前后二级结构含量的变化，结果见表1。人血 HSA荧光的最大发射波长(A。)为337姗，主要来自色氨酸 清白蛋白的圆二色谱在远紫外区208和218姗处有两个负 残基。而丹皮酚在k一280nrn时基本上没有荧光。随着丹 峰，为典型的口+口结构。当丹皮酚加入到人血清白蛋白溶液 皮酚浓度的增加，HSA的内源荧光随之猝灭，且体系中 中，208和218啪处负峰的摩尔椭圆率降低但峰位未发生明 HSA的最大发射峰从336．6啪红移到341．5啪，这表明丹 显的变化。通过208衄处的摩尔椭圆率计算了丹皮酚加入 皮酚与HSA之间的相互作用使HSA发色团的微环境的疏 之后人血清白蛋白的旷螺旋结构含量变化量，结果见表1。 水性降低，蛋白质的构象发生了变化。根据scatchard方程 对二者在296，303，310K下的结合常数进行了计算，分别 T址Ilel fh培IIsA se∞咖stl眦t．1诧deteI瑚i曲ti加f打也e 为2．176×104，1．963×104和1．77