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乙醇和过氧化氢胁迫对Bacillus sp.WSHDZ-01 发酵产过氧化 氢酶的影响1 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 姚丹丹 ，李江华 ，华兆哲 ，邓宇 ，堵国成 ，陈坚 (1 江南大学生物工程学院生物系统与生物加工工程研究室，江苏 无锡214122 2 江南大学生物工程学院，江 苏 无锡 214122) 摘要：以一株高产过氧化氢酶(Catalase，简称CAT) 的枯草芽孢杆菌Bacillus sp.WSHDZ-01 为研究菌株， 考察乙醇和过氧化氢(H O )胁迫对Bacillus sp.WSHDZ-01 产CAT 的影响。通过摇瓶实验获得了乙醇和 2 2 -1 H2O2 的最适添加量、最适添加时间和最适添加方式，即：0h 添加1.0 %(v·v ) 的乙醇，总酶活达13100 -1 -1 -1 U·mL ，与对照8363 U·mL 相比提高56.6%；在0 h、12 h、36 h 分别添加1.0 %(v·v ) 的乙醇，总酶活 -1 ，与对照6060 U·mL -1 相比提高147.5 %。而12 h 添加0.3 %(v·v-1) 的H O ，总酶活达 达15000 U·mL 2 2 9254 U·mL-1 ，与对照7900 U·mL-1 相比提高17.1 %；在12 h、24 h 分别添加0.15 % (v·v-1) 的H O ，总 2 2 酶活达9744 U·mL-1 ，与对照6665 U·mL-1 相比提高46 % 。在此基础上，在3 L 发酵罐上重点研究了 -1 H O 和乙醇的添加策略对菌体产酶的影响，结果表明，0 h 一次性添加1.0 %( v·v ) 乙醇，总酶活达22000 2 2 -1 -1 -1 U·mL ；0 h、12 h、36 h 分批添加1.0 %(v·v ) 乙醇，总酶活达25000 U·mL ；通过分阶段恒速流加乙 醇，总酶活达28000 U·mL-1 。12 h 一次性添加0.3 %(v·v-1) 的H O 总酶活达21600 U·mL-1 ；12 h、24 h 2 2 分别添加0.15 %(v·v-1) 的H O 总酶活达23000 U·mL-1 。可见3L 发酵罐上应用刺激物的添加策略后，与