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思考问题: 什么是基因工程? 目的基因的获得 如何将目的基因导入受体细胞 目的基因的表达 第一步:获取目的基因 限制性内切酶(EcoRⅠ)作用过程 DNA连接酶的作用过程 假设某细菌质粒上抗生素抗性基因为抗四环素的基因。并用此细菌的质粒作运载体,将人的胰岛素基因导入另一种受体细胞(一种不抗四环素的细菌)内。你怎样才能知道目的基因是否导入受体细胞?怎样才知道基因工程是否成功? 概念:又叫做 或 。通俗的说,就是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里, 地改造生物的 。 基因工程的基本步骤 第一步: 的获取 。 第二步: 和 的结合。 第三步:将 导入 。 第四步: 目的基因的 和 。 基因工程用到哪些工具? 第一步目的基因的获取—— 第二步目的基因和运载体的结合—— 第三步将目的基因导入到受体细胞—— 第四步目的基因的表达和检测 课后作业 以同桌为单位运用基因工程方法,设计在大肠杆菌体内合成人类的胰岛素的工程方案,下节课上展示设计成果。 * * 第2节 基因工程及其应用 福清市名师工作室生物学科 福 清 第 二 中 学 祝志安 怪物 1 怪物 2 怪物 3 怪物 4 能发荧光的热带斑马鱼 普通热带斑马鱼是不发荧光的 如何让普通热带斑马鱼也发荧光? 用杂交能不能得到这样的生物? 为什么不是用性状?而是用基因? 要实现这一目标,应该解决哪些问题? 一、基因工程基本步骤 点击播放 1、基因工程的“剪刀” 指“ 限制性内切酶 ” 微生物 一种限切酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定切点切割 已发现的有200多种 种类: 来源: 特点: “ ” 这个特点说明了: 酶具有专一性 1、被同一种限制酶切断的几个DNA是否具有相同的黏性末端? 思考: 2、限制酶的发现有什么意义? 形成的黏性末端不同 基因工程创立的标志 不同的限制酶呢? 具有。 第二步 目的基因与运载体结合 点击播放 连接酶的作用是:将互补配对的两个黏性末端连接起来,使之成为一个完整的DNA分子。 DNA连接酶 2:基因工程的“针线” 指“DNA连接酶” “ ” 作用: 连接“梯子”断口的“扶手”而非“梯子”中间的“踏板”。 其作用与限制性内切酶相反,作用点相同 第三步:将目的基因导入受体细胞 B、质粒的特点 *细胞拟核或细胞核以外的小型的环状DNA分子; *能够自主复制 *具有多个限制酶的切点; *含有标记基因 3、基因工程的运载体 目的基因 A、常用 的运载体: 质粒、噬菌体和动、植物病毒等 标记基因,便于进行检测。 其中质粒存在于许多细菌和酵母菌等生物中,是细胞染色体外能够自主复制的很小的环状DNA分子. C、它们的共同特点是: 都有侵染或进入宿主细胞的能力 抗四环素抗性基因 第四步、目的基因的表达和检测 大量的受体细胞接受不多的目的基因。处理的受体细胞中真正摄入了目的基因的很少,必须将它从中检测出来。 将每个受体细胞单独培养形成菌落,检测菌落中是否有目的基因的表达产物。淘汰无表达产物的菌落,保留有表达产物的进一步培养、研究。 无表达产物 无表达产物 有表达产物 无表达产物 原理: 操作水平: 结果: 地改造生物的遗传性状,获得人类所需要的品种。 目的基因 供体细胞 受体细胞 基因重组 DNA分子水平 基因拼接技术 DNA重组技术 定向 遗传性状 定向 目的基因 目的基因 运载体 目的基因 受体细胞 表达 检测 练习: ⒈实施基因工程的第一步的一种方法是把所需的基因从供体细胞内分离出来,这要利用限制性内切酶。一种限制性内切酶能识别DNA分子的GAATTC顺序,切点在G和A之间,这是利用了酶的( ) A.高效性 B.专一性 C.多样性 D.催化活性易受外界影响 B 2.采用基因工程的方法培育抗虫棉,下列导入目的基因的作法正确的是( )A.将毒素蛋白注射到棉受精卵中 B.将编码毒素蛋白的DNA序列,注射到棉受精卵中 C.将编码毒素蛋白的DNA序列,与质粒重组,导入细菌,用该细菌感染棉花体细胞,再进行组织培养。D.将编
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