云芝糖肽活性炭脱色的研究.pdf

24@ 冯梅等：云芝糖肽活性炭脱色的研究 315 云芝糖肽活性炭脱色的研究 冯梅 杨晓彤。冯慧琴 糜可 陈春峰 杨庆尧 (上海师范大学微生物与免疫学研究所上海200234) 摘要：采用活性炭吸附法对云芝糖肽脱色效果进行了研究，用370hm吸光值检测脱色效果，比较了活性炭量， pH值，温度等不同条件对脱色效果的影响，并用苯酚硫酸法和Lowry法测定脱色前后PSP的多糖和蛋白含量 变化。结果表明当活性炭量添加量为4％(w／v)，pH为6．0，温度为90℃时，脱色率可为46．64％，多糖保留率为 56．76％．蛋白保留率为27．83％。 关键词：云芝糖肽脱色活性炭 ofCoffMus m蕊剧缸PSP)是从云芝(Conblus陀成拗纠液体发酵菌丝 云芝糖肽(polysaccampeptlde 体中提取的一种连接着蛋白质的多糖。大量的药理和临床学研究证明。PSP能显著增强机体的抵抗力．减 轻放疗、化疗引起的毒副反应。抑制肿瘤细胞生长。应用于肿瘤患者，具有补益精气，扶正固本的功效 (Yang．1997。．1998)。云芝糖肽已被批准为国家级二类新药，并成为国际上与日本同类药物Krestin齐名 的唯一云芝类药物。国际市场上。符合各国食品卫生标准的PSP亦已经作为保健品广泛应用于各类健康 人群增加免疫力。 商品云芝糖肽中除糖蛋白分子外还存在棕色的色素。但食品。保健品。化妆品等对产品色泽有要求， 因此这些色素对PSP进一步开发应用造成了一定的限制。因此，我们对PSP中色素的去除进行了研究。 目前常用的脱色方法有很多种，比如H202氧化破坏法，亚硝酸钠脱色法，二氧化硫脱色法等(李端华 和周小华，2004；杨瑞金和黄海，2002)，但这些化学破坏色素的方法很可能会损伤糖蛋自的结构和生理 活性。活性炭脱色法也是常用的脱色方法，脱色条件温和，并已经得到广泛应用(徐勇等，2003；孙颉等， 2001；徐忠和张亚丽，2001；杨云等，2004)。因此。本实验采用该法对PSP中色素的去除做了研究，并比较 了脱色前后PSP的理化指标变化。 1材料与方法 I．1材料和试剂 PSP胶囊由香港百草堂有限公司赠送。767型针剂活性炭购自上海活性炭厂，F0lin一酚试剂购自上海 药检所。其余试剂为国产分析纯。 1．2主要仪器 平，pH计等。 1．3方法 1．3．1 PSP水溶液的制备 将PSP胶囊里的粉末配成xOO．喇mt的水溶液，,t1000l*pm离心10分钟，除去不溶物。 1．3．2活性炭吸附脱色条件实验(常瑜，邢金龙，1995．)。 在PSP水溶液中加入一定量的活性炭。在一定的温度与pH值条件下，搅拌震荡吸附--d,时，0．45um 滤膜抽滤得到上清液。测其光密度吸收．多糖含量．蛋白含量．具体条件为： (1)活性炭量的影响：在自然pH=5．95，温度为30℃条件下，分别加入1％，2％，4％的活性炭，搅拌吸 附一小时。结果见表l： (2)pH值的影响：在30℃，pH值分别为6．O，7．5，4．5的条件下，加入第一步试验结果得出较好的活性 碳量。搅拌吸附一小时。结果见表2： (3)温度的影响：在第二步试验结果得出的较好的pH下，温度分别为30℃，60℃，90℃条件下，加入 4％的活性炭，搅拌吸附一小时。结果见表3。 1．3．3脱色率测定 对PSP水溶液进行吸收光谱扫描。波长范围从700—360nm，在可见光区370hm处有一吸收拐点，故 在实验中选用370hm处的吸光值来测定光密度。脱色率计算公式为：DCR(脱色率)=(0D埘一OD·劫，oD埘 ·通讯作者。地址：上海市桂林路100号14号楼8楼。邮编：200234。email．xtyans@shnu．edu．吼 316 菌物学报 24卷 吸光值。 1．3．4多糖含量的测定(冯慧琴等，2001) 利用苯酚硫酸法测定多糖含量。得出多糖的保留率(多糖保留率=【多糖含It(脱色后)，多糖含量(脱色 前)]x100)。 1．3．5蛋白含量的测定(冯慧琴等，2001) 用lowry法测定蛋白含量，得出蛋白的保留率(蛋白保留率=【蛋白含量(脱