第十三可见分光光度法.pptVIP

（c）化学因素的影响 朗伯-比耳定律假定：所有的吸光质点之间不发生相互作用 * 用仪器测定时应尽量使溶液透光度值在 T =20～65% (吸光度 A =0.70～0.20)。 （二）光度误差（光源不稳定、检测系统的测量误差等） * 三、选择合适的测定条件 （一）波长的选择 问：为什么通常选择波长为?max的光作为入射光？ 1、 在?max处，溶液的吸光系数最大，测定的灵敏度最高。 2、在?max附近，吸收曲线较平坦， ｜Δε｜很小，测定误差小。 （二）空白溶液的选择 空白溶液（参比）以消除溶液中待测组分以外 （其它组分和溶剂）的吸收以及吸收池的反射 等所带来的误差。 1、溶剂空白 2、试剂空白 3、试样空白 * spectrophotometry 分光光度法 absorption spectrum 吸收光谱 transmittance 透光率 absorbance 吸光度 * 若两种单色光以适当的比例混合能产生白色光，则这两种色称为互补色。 * ?max为物质分子中的电子，选择吸收了一定波长的光子，发生电子跃迁引起的。 在分光光度计上，用不同波长的单色光作入射光，按波长由短到长的顺序依次通过同一溶液，测得与各波长相对应的吸光度A ，以A为纵坐标，波长?为横坐标作图，所得曲线即为该溶液的吸收光谱 * * 光源系统——提供波长范围为360~1000nm的连续光谱。 可见光光源为钨灯，要求强度高，稳定性好 分光系统——提供所需波长的单色光。单色器由狭缝、光栅和准直镜组成，要求适当宽度的狭缝，以保证单色光光强和纯度 吸收池——用来盛放溶液的容器。可见光区用光学玻璃，要求光洁、透明、相互匹配 检测系统——进行光电转换、信号放大及输出。由光电管、放大器、指示器、数字显示器和打印器等装置构成 * 根据 Lambert- Beer Law，以该物质吸收光谱图中的?max为入射光，测定被测物质标准品配制的一系列浓度溶液的A。以A为纵坐标，以溶液浓度为横坐标，可得一条通过坐标原点的直线。然后，在相同的实验条件下测定被测液的A，在标准曲线上查出被测液的浓度 * 第十三章 可见分光光度法和 紫外分光光度法（spectrophotometry) * 分析化学 化学分析法 仪器分析法 光谱分析法 色谱分析法 质谱分析法 电化学分析法 核磁共振分析法 可见、紫外、红外分光光度法、荧光光度法、原子吸收法等 激光诱导荧光光谱的灵敏度已达10-22克，达到了检测单个分子的水平， 可用于癌症的早期诊断。 分光光度法是根据物质的吸收光谱和光的吸收定律，对物质进行定量、定性分析的一种仪器分析方法。 所选用的光源 紫外分光光度法 特点：灵敏度高------10-5 mol/L ~10 -6 mol/L 相对误差小------2%~5% 应用广泛-----医药、卫生、环保、化工 可见分光光度法 红外分光光度法 * 第一节 物质的吸收光谱 第二节 分光光度法基本原理 第三节 可见分光光度法 第四节 提高测量灵敏度和准确度的方法 第五节 紫外分光光度法简介（不要求） 本章内容： * 起源于比色法 试金石 * 1、溶液的颜色 紫 400 红 660 橙 600 黄 560 绿 530 青蓝 450 蓝 420 青 500 互补色 溶液的颜色是由于它选择性地吸收了一部分光， 而呈现它的互补色 第一节 物质的吸收光谱 * 2、 物质对光的选择性吸收 （2）不同物质，它们的选择吸收性质不同 （1）同一种物质对不同波长光的吸光度不同。 （3）溶液的颜色并不是某一个波长，而是一个波长带。 * 分子吸收光谱产生：分子吸收外界能量（光、电、热）引起分子能级跃迁，从基态跃迁到激发态 Δ E= E1－ E2= hν = =hc/ λ ΔE = ΔEe +Δ Ev + ΔEr 微观（量子）解释： * A= - lgT = lg I0 It 吸光度 T = It I0 透光率 3、 物质的吸收光谱 * 吸收光谱 （absorption spectrum） ? A 480 520 560nm 最大吸光度相对应的波长称为最大吸收波长 ，?max 光吸收曲线 用不同波长的单色光 照射某一物质测定吸光度， 以波长为横坐标，以吸光 度为纵坐标，绘制曲线， 描述物质对不同波长光的 吸收能力。 * 吸收曲线的形状和?max 定性分析 溶液的浓度愈大Amax愈大(强度特征) 定量分析 吸收曲线作用： *