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1.2.实验概论
实验 检测生物组织中的糖类、脂肪和 蛋白质 还原糖+斐林试剂 ___________________ 苏丹Ⅲ染液 橘黄色 苏丹Ⅳ染液 ______ 蛋白质+双缩脲试剂 ______ 砖红色沉淀 50 ℃~65 ℃ 温水浴 脂肪+ 红色 紫色 1.在检测脂肪的实验中,若选择花生种子作为实验材料,必须提前浸泡3h~4h,以便于切片。 2.在蛋白质的检测实验中,动物材料常用的是鸡蛋的蛋清,但使用时必须稀释,以防反应时粘固在试管内壁上,使反应不彻底且不易洗刷试管。 1.还原糖的检测 选材:含糖量较 高、白色或近于 白色的植物组织 结论:组织样液 中含有可溶性 __________ 砖红色沉淀 还原糖 2.脂肪的检测 方法一:花生种子匀浆+3滴苏丹Ⅲ染液→__________ 方法二: 取材:花生种子(浸泡),将子叶切成薄片 取最理想的薄片,放在载玻片中央 制片 滴2~3滴苏丹Ⅲ染液(染色3 min) 去浮色(1~2滴体积分数为50%的酒精溶液) 制成临时装片(滴一滴蒸馏水,盖上盖玻片) 观察:先在__________下寻找已着色颗粒,再用高倍显微镜观 察 结论:圆形小颗粒呈橘黄色,说明有脂肪存在 橘黄色 低倍显微镜 3.蛋白质的检测 选材与制备:蛋清稀释液或豆浆滤液 结论:组织样液中存在________ 4滴 紫色 蛋白质 1.为什么选材应选用颜色较浅或者无色且含还原糖量高的组织材料? 提示:材料的颜色会干扰实验结果的观察,因此不能选择有颜色的材料,如西瓜、胡萝卜汁、血液、含还原糖多的绿色叶片等;含还原糖量高便于检测,但含糖量高的甘蔗、甜菜(含蔗糖)和马铃薯(含淀粉)也不能选择,因为蔗糖、淀粉为非还原糖。 2.斐林试剂与双缩脲试剂成分相同,但在使用时,斐林试剂甲液与乙液必须混合使用,而双缩脲试剂则先加A液,再滴加B液,请分析原因。 提示:鉴定还原糖的原理是新制Cu(OH)2与还原糖反应,Cu(OH)2被还原为Cu2O(砖红色);检测蛋白质的原理是肽键在碱性环境中与Cu2+反应产生紫色络合物,所以先滴加双缩脲试剂A液的目的是制造碱性环境。 【技巧点拨台】 实验中重要操作归纳 (1)加热:只有鉴定还原糖时,需要在50 ℃~65 ℃温水浴中加热才能出现砖红色沉淀,其余两个实验不需加热。 (2)用量:鉴定蛋白质时,如待测组织样液为2 mL,则A液为1 mL,B液为4滴。注意B液用量不能过量,否则会与A液产生蓝色Cu(OH)2沉淀,干扰实验的紫色现象。 (3)显微镜:脂肪鉴定时可用显微镜,如要观察橘黄色油滴,则一定要在显微镜下观察。 实验方法:选择实验材料的注意事项 【理论指导】 任何一个实验都离不开实验材料的选择,“选对材料就等于实验成功了一半”,对实验材料的选择应把握以下几个方面: 1.符合实验的要求 选择的实验材料应含有符合实验目的要求的观察对象。如观察叶绿体不能选择根细胞,因为根细胞不含叶绿体;观察动物细胞的细胞核不能选择哺乳动物成熟的红细胞,因为此细胞没有细胞核。 2.符合实验的原理 实验原理是完成实验的依据,选择的材料既要保证反应原理的实现,又要方便检测结果的观察。如在检测还原糖时不能选用甘蔗,因为它含有丰富的蔗糖,还原糖的含量少,不利于与斐林试剂发生反应。 3.选取易于获得的材料 要保证实验的顺利进行,应选取在当地容易获得,又比较便宜的材料。如生物组织中淀粉的检测实验不宜选取板栗作实验材料。 4.选取易于观察的材料 选取的实验材料观察现象越明显,越有利于得出正确结论。如观察植物细胞的液泡时不能选用叶肉细胞,因为叶肉细胞的液泡基本无色,并且叶绿体的绿色会对实验结果产生干扰。 5.选取易于操作的材料 选取的材料易于操作,有利于实验的顺利进行。如检测生物组织中的脂肪,不能将芝麻种子做切片观察,因为芝麻种子很小,不容易操作。 【典例分析】 在“检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质”的实验中,提供了如下备选实验材料: 苹果、甘蔗、大米、韭菜的叶、核桃、花生、黄豆。 【分析】实验成功的关键之一是科学选择实验材料,具体分析如下: 含蛋白质丰富,颜色浅 黄豆 蛋白质 含脂肪丰富,颜色浅 花生 脂肪 含淀粉丰富,颜色浅 大米 淀粉 含还原糖丰富,颜色浅 苹果 还原糖 取材的原因 选取的材料 检测的物质 【拓展】 (1)检测还原糖时,为什么不选取甘蔗或韭菜的叶? 提示:甘蔗中主要含有蔗糖,含还原糖很少,不符合选材的要求;韭菜的叶中含有叶绿素,不利于实验现象的观察。 (2)检测脂肪时,为什么不选取核桃? 提示:核桃的种子虽然含有丰富的脂肪,但核桃的果皮坚硬,种皮又有颜色,
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