检验基础技能培训指南.doc

《检验基础技能》课程标准 课程名称：检验基础技能培训课程 培训对象：实习学员、低年资检验技师、进修生 模块一 血液细胞检查 一、培训目的 1. 掌握显微镜红细胞计数的原理和操作。 2. 掌握氰化高铁血红蛋白测定方法的原理和操作。 3. 掌握红细胞形态检查的方法、正常红细胞的形态特点、异常红细胞形态学变化。 4. 掌握显微镜白细胞计数的方法。 5. 掌握外周血白细胞分类计数的方法、各种白细胞的正常形态和病理形态学改变。 二、培训内容 1. 相关基础知识：红细胞计数的检测原理，氰化高铁血红蛋白测定的原理，白细胞计数的原理，白细胞分类计数的原理。 2. 操作要点： （1）红细胞计数：准确稀释红细胞，充分冲池，计数计算。 （2）氰化高铁血红蛋白测定：血红蛋白转化，比色，计算血红蛋白浓度。 （3）红细胞形态检查：血片的制作和染色 （4）白细胞计数：准确稀释血液，充分冲池，计数计算。 （5）白细胞分类计数、白细胞形态：血涂片制备，染色，镜检。 3、扩展内容（选学或自学）：红细胞计数和白细胞计数的临床意义，血红蛋白的临床意义。 三、培训学时：2学时（100分钟） 1、基础知识回顾 10分钟 2、操作要点讲解及示范 20分钟 3、学员操作练习 60分钟 4、教员总结学员操作情况 10分钟 四、培训实施 （一）培训组织 1、学员分组：6-7人/组； 2、教员集中讲解基础知识； 3、教员通过挂图或操作示范等教学手段引导学员回顾血液细胞检查的相关基础知识； 4、教师运用各种器材和试剂进行讲解、操作示范； 5、学员分组进行操作练习； 6、教员逐一指导、检查学员受训情况； 7、教员总结学员受训情况 （二）培训条件要求 1. 培训所需器材（设备）：显微镜、分光光度计 2. 所需耗材：采血用具一套，试管、试管架、吸管（2ml、5ml、0.5ml）、吸耳球、微量吸管、胶吸头、干脱脂棉、玻璃棒、改良Neubauer计数板、盖玻片、绸布、香柏油、拭镜纸、清洁液（乙醚与无水乙醇比例3：7） 3. 试剂： （1）红细胞稀释液：枸橼酸纳1.0g，36%甲醛液1.0ml，氯化钠0.6g，加蒸馏水至100ml，混匀，过滤2次备用； (2) HiCN转化液（文齐液）：氰化钾0.050g，高铁氰化钾0.200g，无水磷酸二氢钾0.140g，Triton X-1001.0ml，蒸馏水加至1000ml，纠正pH至7.0~7.4； （3）标准HiCN参考液（200g/L商品试剂） （4）白细胞稀释液：2%冰乙醇溶液中加入10g/L结晶紫（或亚甲蓝）3滴。 （5）瑞氏染液； （6）磷酸缓冲液（pH6.4~6.8） 4. 标本：EDTA抗凝静脉血或末梢血。 （三）参考资料 主要参考书：《临床检验基础实验指导》第3版，人民军医出版社 《实验诊断学》第七版，人民卫生出版社 相关网站：（百度视频，有哪些信誉好的足球投注网站“临床医学检验”） 五、考核测评 1.考核方式：以操作考试的方式进行。 2.考核标准：按照以下步骤进行，学员边操作边进行简要说明。 具体标准： 步骤 名称 具体内容 评分标准（根据完成情况酌情扣分） 1 红细胞计数 准确加入红细胞l；消毒皮肤，准确取血；擦去管尖外面多余的血液，插入稀释液底部，吸取其上清液清洗吸管；充入血细胞计数池内，注意充池的液量要适宜，使之恰好充满，无气泡及多余液体溢出。静置2～3min，待红细胞下沉后进行计数 20 2 氰化高铁血红蛋白测定 血红蛋白转化：用微量吸管取末梢血，加入HiCN转化液中，充分混匀，；比色：用分光光度计比色，波长540nm，，以转化液或蒸馏水为空白，测定样本吸光度（A）； 20 3 红细胞形态检查 血涂片制备 取末梢血一滴，置于载玻片一端，将推片的一端，放在血滴前面，逐渐后移接触血滴，血滴即沿推片散开，然后使推片与载玻片间以30～45°夹角，平稳向前推动至载玻片的另一端，玻片上便留下一均匀的薄层血膜。自然干燥。 染色 1）用蜡笔在血膜两头划线，以防染液溢出； 2）用瑞氏染液3～5滴，覆盖整个血膜，固定细胞0.5～1min； 3）滴加等量或稍多缓冲液于血膜上，用吸球将其吹匀，染色5～10min； 4）平放玻片，用流水从玻片的一侧冲去染液，待血片自然干燥或用滤纸吸干，即可镜检。 镜检 在低倍镜下观察细胞着色情况，然后选择血涂片体尾部，在油镜下按一定的方向顺序观察红细胞形态。 20 4 白细胞计数 用刻度吸管准确吸取稀释液0.38ml，置于试管内。用一次性微量吸管采末梢血20μl。擦去管尖外部余血，将吸管插入稀释液底部，轻轻将血全部排出，然后吸取其上清液清洗吸管残余血液2～3次。混匀后静置5分钟，待红细胞完全溶解后，充入清洁而干燥的计数池与盖玻片的缝隙中，静置2～3min，使白细胞下沉。计数