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基因工程及其应用
高中二年级下学期人教版生物 第六章第二节
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怎样让奶牛产出人奶呢？
目的基因
供体细胞
受体细胞
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一、基因工程的基本步骤
（一） 、提取目的基因
（二）目的基因与运载体结合
（三）将目的基因导入受体细胞
（四）目的基因的检测和表达
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1、要想获得目的基因必须用限制酶切几个切口？
思考与讨论:
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2、会产生几个黏性末端？
思考与讨论:
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基因的运载体
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用同种限制酶切割
DNA连接酶
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作为运载体必须具备哪些条件？
1.能够在宿主细胞中复制并稳定地保存。
2.具多个限制酶切点，以便与外源基因连接。
3.对宿主细胞无毒害作用。
4.具有某些标记基因，便于进行筛选。
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1、常用的受体细胞：
大肠杆菌、枯草杆菌、酵母菌、动植物细胞等
2、常用微生物作受体细胞的原因：
微生物增殖快、代谢快、目的产物多。
3、若运载体是质粒，受体细胞为细菌应作何处理：
应用CaCl2处理
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操作过程中用到哪些工具？
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（一）、基因的“剪刀”
１、分布：
主要在微生物中
专一性
3’,5’-磷酸二酯键
一般产生黏性末端（或产生平末端）
——限制性核酸内切酶
二、基因工程的工具
４、结果：
3、切割具体部位：
２、作用特点：
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（二）、基因的针线——DNA连接酶
作用：将互补配对的两个黏性末端连接起来，使之成为一个完整的DNA分子。
连接的是什么部位?
3’,5’-磷酸二酯键
Eva
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