第十一章 经典液相色谱法与检测技术讲解.ppt

第三节 平面色谱法 四、操作方法 薄层色谱法的操作可分为制板、点样、展开、显色与检视、系统适用性试验和测定六个步骤。 　 * 第三节 平面色谱法 薄层板： 分为硬板软板，荧光薄层板等。 * 符号 含意 符号 含意 G 以石膏作粘合剂 C 薄层已被分成条带 H 无外加粘合剂 Silanised,RP-2 二甲基硅烷改性的反相 R 特别纯化的 RP 反相 P 制备用 RP-8，RP-18 C-8，C-18烷基改性 W 水可湿性的 NH2 氨基改性亲水层 F254,366 荧光指示剂激发波长 CHIR 手性固定相 F254S 抗酸性荧光指示剂 CN 氰基改性固定相 40,60…… 平均孔径（?） DIOL 二醇基改性固定相 市售吸附剂和预制板包装上的符号及含意 引自/books/C/1226/0.html 知识拓展 1. 吸附剂薄层 2. 涂布器 3. 玻璃夹板 4. 玻璃板 5. 玻璃夹板 过程：载板选择→涂敷→晾干→活化→备用 优点：一次铺多块薄层板，简单易行。 （一）制板 第三节 平面色谱法 （二）点样 点样方法： 划基线 做样品标记 点样 * 平头微量点样器 点样毛细管 注意： ①动作要轻，勿损伤薄层板表面； ②若需多次点样，每次点样后将样品点晾干或吹干后，再二次点样，样点直径不超过3mm为宜； ③展开后斑点集中，各点面积大小基本一致。 第三节 平面色谱法 * （三）展开 展开方式：单向展开、双向展开、多次相展开等。 单向展开中的上行展开 前沿 ? ? 1.5~2.0cm 1 2 展开 预饱和 第三节 平面色谱法 边缘效应 * （四）显色与检视 1. 物理方法 有颜色物质 紫外光下显色 荧光板分离 紫外光下发荧光 2. 化学方法 第三节 平面色谱法 * （五）系统适用性试验 1. 检测灵敏度 对照溶液稀释若干倍的溶液应显示清晰的斑点 2. 比移值 应在0.2～0.8 之间 3. 分离效能 对照品与结构相似物质，应显示两个清晰分离的斑点。 第三节 平面色谱法 * （六）测定 1. 定性鉴别 利用斑点的颜色（或荧光）和斑点位置（Rf或Rr) 2. 杂质检查 3. 定量分析 定量分析时注意： ①色斑要集中、无拖尾现象； ②应选用对被测组分有较大溶解度的溶剂浸泡并多次洗脱； ③对吸附性较强、不易洗脱的组分，可采用离心分离或滤过等方法进行定量洗脱。 可采用杂质对照品法、样品溶液的自身稀释对照法或杂质对照品法与样品溶液自身稀释对照法并用。 （1）目视比色法 （2）洗脱法 （3）薄层扫描法 第三节 平面色谱法 应用 　适用于有机化合物的分离与鉴定，也可用于小量物质的提纯与精制。在药学领域中，可用于测定药品纯度和检查降解产物；判断药品合成反应进行的程度、监控反应历程；分离和测定天然药物的有效成分。 　 * 第三节 平面色谱法 第三节 平面色谱法 * 纸色谱法：以滤纸为载体的平面色谱法，属于分配色谱的范畴，一般为正相色谱。 纸色谱的固定相一般为纸纤维及其吸着的水，展开剂常为一些含水的有机溶剂。 纸色谱法滤纸的选用： ①纯净，无明显荧光斑点； ②均匀无痕，有一定的机械强度； ③纸纤维松紧适宜； ④对相差很小的化合物，宜选用慢速滤纸；而相差较大的化合物，则选用快速滤纸。进行定性分析时，宜选用较薄的滤纸；而进行制备或定量分析时则应采用厚的滤纸。 * 第三节 平面色谱法 第三节 平面色谱法 1.Rf与Rr均为物质定性鉴定的依据。Rf在0～1之间，0.2～0.8为可用范围，0.3～0.5为最佳范围；Rr可大于1，也可小于1。 2.吸附薄层色谱吸附剂与展开剂选择原则与吸附柱色谱相同。 3.混合展开剂：一般占比例较大的溶剂起着溶解物质和分离的作用，而占比例小的溶剂则起着调整溶剂极性、改善 值的作用。 4.薄层色谱操作方法：制板、点样、展开、显色与检视、系统性实验、测定。 5.薄层色谱测定：定性鉴别、杂质检查、定量分析。 * 点滴积累 第十一章 经典液色谱法与检测技术 一、选择题 （一）单项选择题 1. 分离性质极其相似的物质的最佳方法是 A. 萃取 B. 蒸馏 C. 滴定 D. 色谱法 2. 色谱法中吸附剂含水量越高则 吸附力越强 B. 活性级别小 C. 活性高 D. 吸附力越弱 * 【目标检测】 第十一章 经典色谱法与检测技术 3. 分配柱色谱中，分配系数大的组分在柱中 迁移速度快 B. 迁移速度慢 C. 保留体积小 D. 保留时间短 4.色谱法最大的特点是 A.定性分析