第二章 天然产物化学成分提取分离方法讲解.ppt

* * * * （一）已知化合物鉴定的一般程序和方法 1.纯度检验 2.测样品的物理常数，与已知标准品的文献值对照， 比较是否一致或接近。 3.测样品与标准品的混熔点。 4.将样品与标准品在三种溶剂系统中共色谱 (PC或TLC),比较其Rf值是否一致。 5.测样品的IR光谱图,与标准品的图谱或与标 准谱图进行比较。 检查纯度的方法： 外观、颜色、形态是否均一； 测定各种物理常数，如熔点、沸点、比旋光度、 折光率等，这些物理常数都能反映化合物的纯度。 如果是已知物，用已知结构的对照品进行 对照测定或测定它们的共熔点等； 也可对照文献报导值（注意各种测定条件的一致性） 薄层层析（三种展开系统和三种显色方法） GC、HPLC等； (二)未知物结构测定的一般程序与方法 1.纯度检验，物理常数测定，与文献值比对。 2.进行检识反应，确定样品类型。 3.进行元素定性、定量分析，测得分子量， 确定分子式。 4.测四谱并综合分析四谱数据，推导出化合物 的基本结构骨架信息。 5.根据推出的结构，将所测得的四谱，特别是 NMR谱的数据进行归属分析验证。 ← 二、四大谱在结构测定中的应用 （一）紫外 — 可见光谱（UV -VIS） 原理：分子中电子跃迁引起的吸收，其中n-π*、 π-π* 的跃迁可因吸收紫外光及可见光所引起， 吸收光谱将出现紫外区和可见光区(200~700nm)。 200nm 400nm 700nm 紫外区（UV） 可见区（VIS） 应用： （1）推断化合物的骨架类型—— 共轭体系。 （2）取代基团的位置、种类、数目的推断。 （3）用于定量测定（以最大吸收波长作为检 测波长进行含量测定）。 特点： 样品用量少（只需5-10 μg） 样品能回收测定； 常规紫外光谱仪价格低廉； （二） 红外光谱（IR） 原理：分子中价键的伸缩及弯曲振动所引起的吸收而 测得的吸收图谱，称为红外吸收光谱。 4000 3600 3000 1500 1000 625cm-1 特征频率区 指纹区 特征官能团的鉴别 化合物真伪的鉴别 羟基（酚羟基、醇羟基） 3600~3200 cm-1 游离羟基 ~3600 cm-1 氢键缔合羟基 3400~3200 cm-1 羰基 1600~1800 cm-1 酮 ~1710 cm-1 酯1710~1735 cm-1 芳环 1600、1580、1500cm-1有2~3个峰 双键 1620~1680 cm-1 两个化合物完全相同的条件 1、 特征区完全吻合 2、 指纹区也需完全一致 应用：IR对未知结构化合物的鉴定，主要是用于官能团 的确认、芳环取代类型的判断等定性分析。 特征官能团的鉴别 化合物真伪的鉴别 IR用于鉴定化合物的方法有两种： (1)与标准物谱图对照法。在相同条件下，若 两个谱图完全吻合，则两物质相同；否则 不同。 (2) 标准谱图查对法。如无对照品，也可检索 有关IR数据图谱文献，如被测物结构基本 已知，可能局部构型不同，在指纹区就会 有差别。 谱图三要素：位置、强度、峰形 测定范围 波数600～4000cm -1之间。 其中1600cm-1以上为化合物的特征基团区， 1000-500cm-1为指纹区。 应用 主要用于定性分析，功能基的确认，芳环取代类 型的判断等。 优点：样品用量少（只需5-10 μg） ? 任何气态、液态、固态样品均可测定； ? 每种化合物都有红外吸收； ? 常规红外光谱仪价格低廉； 红外光谱 NMR谱：化合物分子在磁场中受电磁波的辐射， 有磁距的原子核吸收一定的能量产生能级 的跃迁，即发生核磁共振，以吸收峰的 频率对吸收强度作图所得之图谱。 NMR谱所提供的结构信息有：氢及碳原子的类型、数 目、相互连接方式