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(3)在直径4.5cm高5.0cm的小玻璃杯注入不同浓度的供试药液3ml和稀释10倍的培养液6ml,每杯播入上述去胚乳小麦幼苗10株。 (4)在温度21~26℃左右和光照下培养6~7d后观察药效。注意每天应该给每个小杯称重,补足损失的水分。 1 2 3 4 5 CK 测量所有小麦苗的生长量,即从芽鞘到最长叶尖的距离,并按下式求出生长抑制率,继而求出EC50 对照生长量一处理生长量 生长抑制率(%)=-----------X 100 对照生长量 结果检查与计算 本法是由南开大学元素所谭惠芳等建立的。对测定触杀型除草剂较敏感,如百草枯、杀草快、除草醚、敌稗等。另外,对通过干扰体内含氮化合物代谢而杀草的除草剂也很敏感,如杀草强、杀草胺, 2,4-D, 2,4,5-T、二氯丁酸等。 6.萝卜子叶法 * 第四章 除草剂生物测定技术 除草剂生物测定的意义 除草剂生物测定的基本原理 除草剂生物测定技术程序和原则 除草剂生物测定方法简介 除草剂田间药效试验 一、除草剂生物测定的意义 生物测定是除草剂研究种不可缺少的手段 某种化合物是否具有杀草活性 为特定杂草筛选一种除草剂 除草剂作用方式的研究 二、除草剂生物测定的基本原理 试验均在同一控制条件下 必须设对照,每一处理重复3-4次 试材应该健壮、整齐、随机排列 测定结果应进行统计学分析 在一定范围内,生物试材与除草剂浓度 成比例的伤害反应 三、除草剂生物测定技术的程序和原则 (-)生物测定材料的选择 试材的选择应兼备对药剂较感性高和具有一定的可测范围以及大量易得的均一材料。 (二)测定参数的选择 试材对除草剂的反应可以通过各种参数来评价。除草剂对植物的影响一般为非专一性的,因此,各种器官均能作为某一除草剂的活力指标。 种子发芽率 许多除草剂可抑制敏感种子的发芽及胚根和芽鞘的生长、因此,可以利用观察种子的萌发率来测定某种药剂的存在与否。 植株生长量 在生物测定中,试材重量的测定是最常用的。 主要测定参数 生理生化指标 在肉眼可见的反应出现之前,试材的生理生化的变化往往可以测定出来。植物呼吸和光合作用以及所含成分或新陈代谢物质的变化等都可以作为测定的指标。 症状 有些除草剂可引起试材的典型症状,因此,可以利用此种反应来鉴定除草剂。 特殊技术 Parker以青萍为试材,以百草枯和脲类除草剂的拮抗作用来测青萍的浓度;若以愈伤组织为试材,则测愈伤组织的生长量。 测定结果表达方法 正确地评价某一药剂的生物测定结果是很重要的 。 常用地上部鲜重减少50%(ED50)、地上部干重减少50%〔CR50〕、株高减少50%(LD50。或ED50)及覆盖面积减少50%(EC50)所需要的除草剂量来表示这一类试验结果。 Y=a+bx 0级——同对照 1级——抑剂生长25%以下 2级——抑制生长50%以下 3级——抑制生长75%以下 4级——抑制生长75%以上 5级——死亡 目测的分级标准 四、除草剂常用的生物测定方法 黄瓜幼苗法 小杯法 小球藻法 去胚乳小麦幼苗法 浮萍法 种子发芽测定法是一种常用的除草剂活性测定方法,种子发芽率、根与茎的生长量或作长度在一定范围内与药剂剂量呈相关性,因此可用作除草剂的定量测定,有较高的灵敏度。 种子发芽测定法 1.发芽率 调查对照处理和药剂处理种子的发芽数量,然后计算发芽率。 药剂处理的发芽数 发芽率(%)=一一――――――――X 100 对照处理的发芽数 调查项目 2.生长抑制率 测定发芽以后芽或根的长度,或者是测量鲜重或干重(较少)。 对照处理一药剂处理 生长抑制率(%)=---―――――――X100 对照处理 1.黄瓜幼苗形态法 。。。。 。。。。 。。 。。。。 。。。。 。。 。。。。 。。。。 。。 。。。。 。。。。 。。 。。。。 。。。。 。。 1 2 3 4 CK 57%2,4D丁酯乳油对黄瓜种苗的抑制作用 100mg/L 10mg/L 1mg/L 1mg/L 0.01mg/L CK 本方法是测定激素类除草剂及其他植物生长调节剂活性的常用方法,具有反应灵敏、测定范围大(0
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