动物细胞融合浅析.ppt

思考题 1.植物体细胞杂交时首先应用什么方法去掉细胞壁？ 制备单克隆抗体过程中两次筛选 第一次筛选是将未融合的B淋巴细胞、骨髓瘤细胞以及BB融合、瘤瘤融合的细胞通过选择培养基淘汰，筛选出杂交瘤细胞。 第二次筛选是将产生特定抗体的杂交瘤细胞通过细胞培养用相应抗原检测的办法筛选出来。因为从体内取免疫过的B淋巴细胞时可以取出很多种，因此形成的杂交瘤细胞也有很多种，所以需筛选出产生特定抗体的杂交瘤细胞。 5．在现代生物科技的应用中，需要进行检测与筛选的是（双选）(　 　) A．对植物的离体组织进行培养，大规模培育优良品种 B．将鼠的骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，制备单克隆抗体 C．利用人的皮肤细胞进行体外培养，解决自体移植皮肤不足的问题 D．将抗虫基因导入植物细胞，培育具有抗虫特性的新植株 * 选修3 现代生物科技专题 2.2 细胞工程 2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体 “番茄—马铃薯”（理想图） 通过长期的实验，科学家们采用植物体细胞杂交技术获得了“番茄—马铃薯”植株。 杂种植株 融合的原生质体AB 再生出细胞壁 脱分化 愈伤组织 再分化 过程 植物细胞A 原生质体B 原生质体A 杂种细胞AB 去 壁 去 壁 人 工 诱 导 方法？ 植物细胞B 植物体细胞杂交技术 纤维素酶、果胶酶等 物理法：离心、振动、电激等 化学法：聚乙二醇等试剂 筛选 如果将奶牛的细胞与植物细胞杂交，得到绿色的小奶牛，那岂不是只要晒晒太阳就可以挤出牛奶吗？ 动物细胞也能融合吗？ 动物细胞的全能性会随着动物细胞分化程度的提高而逐渐受到抑制，分化潜能逐渐变弱 动物细胞培养技术 动物细胞融合技术 制备单克隆抗体技术 动物细胞核移植技术 动物细胞工程常用技术 酶解法，如纤维素酶或果胶酶 2.动物细胞融合时需要进行去壁处理吗？为什么？ 无需，因为动物细胞无细胞壁 3.植物体细胞杂交诱导原生质体融合常用的方法有哪些？ 离心、振动、电激等物理方法；聚乙二醇等化学方法 4.动物细胞融合能利用上述两类方法吗？还有其他方法吗？ 能 还可以利用灭活的病毒进行诱导 5.植物体细胞杂交应先进行原生质体的融合再进行组织培养形 成完整的杂种个体，动物细胞融合后能形成杂种动物个体吗？ 不能，只能形成杂种细胞 可用胰蛋白酶将细胞分散 一、动物细胞融合技术 1.概念： 动物细胞融合（cell fusion）也称为细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传物质的单核细胞，称为杂交细胞。 结果： “2个或多个动物细胞”→“1个杂交单核细胞”” 2、诱导方法 物理法：离心、振动、电激 化学法：聚乙二醇（PEG) 生物法：灭活的病毒 病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。 举例： 仙台病毒 紫外线 丧失感染性 保留融合活性 （诱导细胞融合） 用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程 细胞核 病毒颗粒 细胞核 灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面 细胞膜被病毒颗粒穿通 细胞膜连接 细胞融合，形成单核杂交细胞 原理：细胞膜具有一定的流动性 有丝分裂 4、过程： 动物细胞A 动物细胞B 诱导，融合 杂交细胞AB 有丝分裂 （膜融合、质融合、核融合） 注意：动物细胞的融合也需要把多个两种细胞放在一起，让它们随机融合后，再从中筛选杂交细胞。 3、原理： 细胞膜的流动性 6、应用： 成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。 特别是利用杂交瘤技术制备单克隆抗体。 5、意义： 突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交 （种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。 植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 用途 结果 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 原理 细胞融合前的处理 诱导方法 意义 细胞膜的流动性、细胞的全能性 细胞膜的流动性 去除细胞壁后诱导原生质体融合 使细胞分散后诱导细胞融合 物理（离心、振动、电刺激）化学（PEG） 物理、化学方法灭活的病毒 培育新品种 制备单克隆抗体、病毒疫苗、干扰素等 形成杂种植株 形成杂种细胞，生产细胞产品 突破有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能 1、在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是 A．诱导融合的方法完全相同 B．所用的技术手段完全相同 C．所采用的原理完全相同 D．都能形成杂种细胞 D 2、下列关于动物细胞融合，叙述正确的是 A．动物细胞融合后形成的具有原来两个或多个动物细胞遗传信息的双核或多核细胞称为杂交细胞 B．原理是细胞的全能性 C．打破生殖障碍，使远缘杂交成为现实 D