_微生物的实验室培养(人教版选修1)解答.ppt

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10.某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察与计数。请回答与此实验相关的问题: (1)培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了____________和____________。除此之外,培养基还必须含有基本成分是____________和____________。 (2)对培养基进行灭菌,应该采用的方法是________________________________________________________________________。 (3)为了尽快观察到细菌培养的实验结果,应将接种了湖水样品的平板置于____________中培养, 培养的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠,还应该同时在另一平板上接种____________作为对照进行实验。 (4)培养20小时后,观察到平板上有形态和颜色不同的菌落,这说明湖水样品中有____________种细菌。一般说来,菌落总数越多,湖水遭受细菌污染的程度越____________。 (5)如果提高培养基中NaCl的浓度,可以用于筛选耐____________细菌,这种培养基被称为____________。 (1)氮源(碳源不作要求) 碳源 无机盐 水 (2)高压蒸汽灭菌 (3)恒温培养箱 无菌水 (4)多 高 (5)盐(或NaCl) 选择培养基 * 课题1 微生物的实验室培养 1.提供营养和条件 2.防止污染 一.培养基: 微生物生存的环境和营养物质 1.基本成分: 碳源、氮源、水、无机盐 ⑴碳源 无机碳源: 有机碳源: CO2、CO32-、HCO3- 牛肉膏、蛋白胨等 自养微生物 异养微生物 ⑵氮源 无机氮源: 有机氮源: NH4+、NO3- 牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等 注:含C、H、O、N的有机物是异养型微生物的: 碳源、氮源、能源。 一.培养基: 微生物生存的环境和营养物质 2.特殊营养: 维生素(如乳酸杆菌)、碱基等 (牛肉膏、酵母膏、蛋白胨中含有) 3.pH、氧气的需求: 霉菌(pH调至酸性) 细菌(pH调至中性或微碱性) 厌氧生物需提供无氧条件。 一.培养基: 微生物生存的环境和营养物质 4.培养基种类 固体培养基 液体培养基 有无 凝固剂琼脂 分离 鉴定 工业 生产 化学成分: 物理性质: 天然培养基 合成培养基 牛肉膏蛋白胨培养基 是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基。 1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的配方 H2O 定容至1000ml NaCl 5g 蛋白胨 10g 牛肉膏 5g 琼脂20.0g 5. 配制原则 ⑴目的明确: ⑵营养全面、浓度适宜、比例恰当 ⑶适宜的pH值: 有机碳源 异养型: 根据微生物的种类、培养目的选择原料 自养型: 不加碳源 加入缓冲剂 细菌偏碱,真菌偏酸 (CO2碳源) 生产 科研 耐高温需保持干燥的 物品,160~170℃ 1~2小时 接种环、接种针等 金属用具 70~75℃、30min 80℃、15min 100℃、5~6min 消毒 灭菌 定义 方法 较为温和理化方法, 杀死部分有害菌体 (不包括芽孢、孢子) 强烈的理化方法, 杀死所有微生物 (包括芽孢、孢子) 煮沸消毒法 巴氏消毒法 化学药剂 紫外线 灼烧灭菌 干热灭菌 酒精、氯气、石炭酸等 高压蒸汽灭菌 培养基, 100KPa、 121℃、15~30min 二.无菌技术: 防止外来杂菌的污染 1.消毒与灭菌: 请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要,请选择合适的方法。 (1) 培养细菌用的培养基与培养皿 (2) 玻棒、试管、烧瓶和吸管 (3) 实验操作者的双手 2.无菌范围: 实验操作空间消毒 操作者的手、衣着消毒 实验用具灭菌 实验操作过程 二.无菌技术: 防止外来杂菌的污染 1.消毒与灭菌: 酒精灯旁操作 超净工作台 单个 或少数菌体 2.特征: 大小、形状、光泽度、 颜色、透明度等。 3.功能: 1.定义: 三.菌落 鉴定菌种的重要依据 固体培养基上 大量繁殖 子细胞群体 1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的配方 H2O 定容至1000ml NaCl 5g 蛋白胨

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