【全国百强校】湖南省长沙市长郡中学高中生物选修1：专题二1《微生物的实验室培养》(共78张)素材.pptVIP

3.在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？ 3.在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？ 答：划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。 　　一旦划破，会造成划线不均匀，难以达到分离单菌落的目的； 　　二是存留在划破处的单个细胞无法形成规矩的菌落，菌落会沿着划破处生长，会形成一个条状的菌落。 稀释涂布平板法 注意： 移液管需要经过灭菌。操作时，试管口和移液管离火焰1~2cm处. 涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第2步应如何进行无菌操作？ 问题讨论 涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第2步应如何进行无菌操作？ 应从操作的各个细节保证“无菌”。例如，酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围等等。 问题讨论 微生物的恒温培养 微生物的恒温培养 微生物的恒温培养 菌种的保存 1.临时保藏： 接种到固体斜面培养基，菌落长成后置于4℃冰箱保存。 2.长期保存： 甘油冷冻管藏法 微生物的实验室培养.DAT 四、实验操作成果评价 （一）培养基的制作是否合格 如果未接种的培养基在恒温箱中保温1～2 d后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。 （二）接种操作是否符合无菌要求 如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致，并符合大肠杆菌菌落的特点，则说明接种操作是符合要求的；如果培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程中，无菌操作还未达到要求，需要分析原因，再次练习。 （三）是否进行了及时细致的观察与记录 培养12 h与24 h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同，及时观察记录的同学会发现这一点，并能观察到其他一些细微的变化。这一步的要求主要是培养学生良好的科学态度与习惯。 * 2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方 3.不管哪种培养基，一般都含有水、碳源、和氮源、 无机盐等营养物质，另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。 1000mL牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成 培养基组分 提供的主要营养 牛肉膏5g 碳源、磷酸盐和维生素 蛋白胨10g 氮源和维生素 NaCl 5g 无机盐 H2O定容在1000mL 氢元素、氧元素 ?4.培养基的用途 ?4.培养基的用途 液体培养基：增菌、工业生产 固体培养基：纯化（分离），　　　　　　鉴定、活菌计数、　　　　　　保藏菌种 半固体培养基：动力检测 三、无菌技术 三、无菌技术 1.无菌技术的概念 　　无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。 1.无菌技术的概念 　　无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。 　　成功地培养微生物的关键。 三、无菌技术 （1）消毒定义： 2.消毒与灭菌的概念及两者的区别 （2）灭菌的定义： 微生物实验室培养的基本操作程序 1. 器具的灭菌 2. 培养基的配制 3. 培养基的灭菌 4. 倒平板 5. 微生物接种 6. 恒温箱中培养 7. 菌种的保存 四、实验操作 (一)制备牛肉膏蛋白胨培养基(用于培养细菌) 倒平板操作 1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？ 关于倒平板操作的问题讨论： 1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？ 答：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。 关于倒平板操作的问题讨论： 2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。 3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 答：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？ 4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还