基因工程复习范例.ppt

* 1. 工具酶的发现和基因工程的诞生 2. 基因工程的原理和技术 3. 基因工程的应用 基因工程 第一节 ?工具酶的发现和基因工程的诞生 1.对于限制性核酸内切酶，只要求了解教科书中的两种限制性核酸内切酶的碱基识别序列和切割位点。单核苷酸链的走向不做拓展。 2.?“小资料：基因工程的载体”只作为背景材料供学生阅读，不要求学生记忆或掌握具体的内容。 说明 解释限制性核酸内切酶、DNA连接酶和质粒在基因工程诞生的作用。 发展要求 1．说出基因工程的含义并指出基因工程的主要内容。 2．说出限制性核酸内切酶的含义及作用特点。 3．说出DNA连接酶的作用。 4．简述质粒的含义、特性及其在基因工程中的作用 基本要求 一、学一学，我们的学习目标 二、品一品，我们的高考形式 （09样卷）3．下列有关基因工程的叙述，正确的是 A．目的基因进入受体细胞后不随受体细胞繁殖而复制 B．根据蛋白质中氨基酸序列推测的目的基因只有一种 C．运载体具有标记基因是为了便于筛选含有目的基因 的受体细胞 D．基因工程所需的限制性内切酶、受体细胞和运载体 都与细菌有关 （10样卷）3．下面是四种不同质粒的示意图，其中ori为复制必需的序列，amp为氨苄青霉素抗性基因，tet为四环素抗性基因，箭头表示一种限制性核酸内切酶的酶切位点。若要得到一个能在四环素培养基上生长而不能在氨苄青霉素培养基上生长的含重组DNA的细胞，应选用的质粒是 （11年浙江卷）6、ada（腺苷酸脱氨酶基因）通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。下列叙述错误的是 A. 每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒 B. 每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点 C. 每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个ada D. 每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子 获得目的基因的方法；农杆菌转化法； 基因工程的工具酶。 12浙江卷 基因工程的应用；目的基因的表达。 11浙江卷 基因工程的工具酶；受体细胞； 目的基因表达的检测。 10浙江卷 质粒的特性与作用。 10样卷 目的基因的来源、受体细胞的来源； 基因工程的应用；标记基因的作用。 09浙江卷 获得目的基因的方法；标记基因的作用； 基因工程的工具、受体细胞。 09样卷 考点分布 试题来源 目的基因表达的检测。 13样卷 目的基因的获得；载体；DNA连接酶 13浙江卷 质粒的特性；获得目的基因的方法； 农杆菌转化法。 13测试卷 考点分布 试题来源 特点：考查难度并不大，考点均为书本内容（因此 要多关注教材），对过程的考查属简单记忆。 动向：基因工程的考查题型由选择题转变成简答题， 并且与遗传题进行了整合。 三、理一理，我们的知识体系 四、查一查，我们的问题所在 1、限制性核酸内切酶的识别序列是 GAATTC ，只能在 G 和 A 之间切断DNA？ 限制性核酸内切酶切割后形 成的DNA片段必然出现粘性末端？ 2、DNA序列 GAATTC 只能被一种限制性核酸内切酶切 开？ 3、同一种粘性末端只能由同一种限制性核酸内切酶切割 产生吗？ 4、它切断的是碱基和碱基之间的化学键？ 5、不同限制酶识别序列和切割位点可以相同？ 工具酶一：限制性核酸内切酶 四、查一查，我们的问题所在 工具酶二：DNA连接酶 1.DNA连接酶能将任意2个DNA片段通过碱基配对黏合？ 将两个具有相同粘性末端的DNA片段连接成一个DNA。 2.比较DNA连接酶与DNA聚合酶的作用， 限制性核酸内切酶与DNA酶的作用。 DNA(水解)酶 限制性核酸内切酶 DNA聚合酶 DNA连接酶 参与的生理过程及应用 作用 名称 连接两个DNA片段 在脱氧核苷酸连上添加单个脱氧核苷酸 切割某种特定的脱氧核苷酸序列，形成DNA片段 把DNA水解成游离的脱氧核苷酸 基因工程 DNA复制 基因工程 四、查一查，我们的问题所在 DNA载体：DNA连接酶 1.基因工程的载体有哪些？ 2.质粒的含义、分布？ 3.任何质粒都可以作为基因工程的载体？ 质粒（主要）、 λ噬菌体、动植物病毒 含义： 分布： 质粒是能够自主复制的双链环状DNA分子 存在于细菌、酵母菌等生物的细胞质中 筛选具有以下特点的质粒： ①能在受体细胞中复制并稳定保存。 ②具有一至多个限制酶切点，以便与外源基因连接。 ③具有标记基因（如抗性基因），便于进行筛选。 4、大肠杆菌质粒可以作为转基因植物的载体？ 5、噬菌体可以作为转基因动物（转基因植物）的载体？ 五、纠一纠，我们曾经的错题 1．用DNA连接酶把被限制性酶Ⅰ（识别序列和切点是 －↓GATC－）切割过的载体和被限制酶Ⅱ（识别序 列和