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面粉中淀粉含量的测定（2005年10月3日） 作者：草君 转贴自：本站原创 　　 面粉中淀粉含量的测定 【摘 要】本文从面粉中淀粉含量测定的材料与方法的角度出发，分别就其测定原理、仪器与设备、选用试剂以及测定方法与过程重点阐述了酶-酸水解法测定面粉中淀粉的含量。另外，对其他精确测定方法如酸水解法、酶-直接测定法和蒽酮法以及粗测方法的内容和特点作了比较和讨论。最后就面粉中淀粉含量的测定方法作了展望，随着仪器分析的发展，面粉中淀粉含量的测定方法无论是在精度还是在测定速度上必将迎来新的春天。 【关键词】淀粉含量 测定 酶-酸水解法 前 言 本学期开设的《工业发酵分析》课程给我印象特别深刻，不知是老师还是这门课程本身给我精神上的触动，或许二者兼而有之。作为工科的学生，接触到这类属于应用型且操作性很强的课程，我受到了很大的鼓舞。虽然任课教师李晓雯老师对这篇文章的写作要求已经比较严格了，而我自己则更从思想和行动上严格要求自己把这篇文章写好。我想，自己作为工科的学生，这个属于工科学生的课程学习和锻炼机会绝不能浪费。于是，通过几个晚上的资料查找、语言组织和修改，终于完成了如下的文章。恳请老师和同学多多批评、指正，毕竟自己是第一次写这样的关于应用性很强的文章。 材料与方法 一、 测定原理 面粉经除去蛋白质、脂肪及可溶性糖类后，其中淀粉用淀粉酶水解成双糖，再用盐酸将双糖水解成单糖，最后按还原糖测定，并折算成淀粉（酶-酸水解法）。 二、仪器与设备 分析天平1台、恒温水浴锅1台、电炉1台、碱式滴定管1支、容量瓶（250ml1和100ml各个）、250ml锥形瓶若干、大小烧杯若干、不同容量的移液管若干和洗耳球等。 三、选用试剂 除特殊说明外，实验用水为蒸馏水，试剂为分析纯。 1、干燥面粉。 2、乙醚、85 %乙醇、甲基红指示剂。 3、0.5 % 淀粉酶溶液：称取淀粉酶（Sigma公司， E.C3.2.1.1）0.5 g，加100 ml水溶解，加入数滴甲苯或三氯甲烷，防止长霉，贮于冰箱中。（注：配成溶液的淀粉酶破坏很快，最好现用现配）。 3、碘溶液：称取3.6 g碘化钾溶于20ml水中，加入1.3 g碘，溶解后加水稀释至100ml。 4、6mol/L盐酸、5mol/L氢氧化钠溶液、0.1mol/L氢氧化钠溶液。 5、斐林试剂：称取15g硫酸铜及0.05g次甲基蓝溶于水中，并稀释至1000ml得斐林甲；称取50g酒石酸甲钠及75g氢氧化钠，溶于水中再加4g亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至1000ml得斐林乙。 6、乙酸锌溶液：称取21.9g乙酸锌，加3ml乙酸，加水溶解并稀释至1000ml。 7、10.6%亚铁氰化钾溶液。 8、葡萄糖标准溶液：用分析天平精密称取1.000g经98～100℃干燥至恒重的纯葡萄糖，加水溶解后，加5ml盐酸，并以水稀释至1000ml，此液每毫升相当于1mg葡萄糖（C%=0.1%）。 四、测定方法与过程 1、样品溶液的制备 称取面粉2.5g左右置于烧杯中，加水50ml于烧杯内，将烧杯置沸水浴上加热15min，使淀粉糊化，放冷至60℃以下，加20ml淀粉酶溶液，再55～60 ℃保温1h，并时时搅拌（注：温度过高，淀粉酶的活性破坏）。然后取1滴此液加1滴碘溶液，应不现蓝色，若显蓝色，再加热糊化并加20ml淀粉酶溶液，继续保温，直至加碘不显蓝色为止。加热至沸，冷后移入250ml容量瓶中，并加水至刻度，（样品内如含较多蛋白质、脂肪、色素和胶体等可加乙酸锌溶液直至沉淀完全为止，再加入亚铁氰化钾溶液至不再产生沉淀为止），加水至刻度，摇匀，过滤（注：此时淀粉已水解成双糖，过滤可去除残渣及其他沉淀物质）。弃去初滤液，取50ml滤液，置于250ml锥形瓶中，加5ml的6mol/L盐酸，在60～70℃水浴中水解20min左右，冷后加2滴甲基红指示剂，再加5mol/L氢氧化钠溶液至无色，再加一滴盐酸进行回滴变红即可，并加0.1 mol/L氢氧化钠溶液至溶液无色即得中性溶液，溶液转入100ml容量瓶中，洗涤锥形瓶，洗液并入100ml容量瓶中，加水至刻度，混匀备用（淀粉在沸水浴条件下糊化是淀粉水解的第一步反应，然后在淀粉酶的作用下，分解成短链淀粉、糊精、麦芽糖等低聚合的糖，所以在淀粉酶解后需用酸进一步水解得到葡萄糖）。 2、斐林试剂的标定 吸取已配置好的斐林试剂甲、乙各5ml并加10ml水和洁净玻璃珠2颗于锥形瓶中并在石棉网上加热至沸腾，用标准的葡萄糖溶液进行预滴定，先快后慢滴定至溶液蓝色褪去，记录用量；正式滴定时，先加入比预滴定少0.5～1.0 ml的标准葡萄糖溶液，2