新型四羧基铝酞菁二氧化硅核壳荧光纳米粒子的制备及在荧光免疫分析中的应用.pdf

1月 湖北·武汉 2006年1 第四届海峡两岸分析化学学术会议论文集 新型四羧基铝酞菁一二氧化硅核壳荧光纳米粒子的制备 及在荧光免疫分析中的应用 陈小兰“，邹健莉1，黎中宝2 (1，厦门大学化学化工学院化学系，厦门361005：2．集美大学水产学院，厦门361021) 本文通过调控荧光功能化硅烷前体和四乙氧基硅烷以及3．氨丙基三乙氧基硅烷在反相胶束 体系中的水解缩合，首次制各了四羧基铝酞菁一二氧化硅复合荧光纳米粒子。并用以标记羊抗人 IgG抗体，建立了基于纳米粒子标记的夹心型荧光免疫分析测定人IgG的方法。 1试剂与仪器 四羧基铝酞菁(AIC4Pc)参考文献合成…；Triton 实验用水均为二次重蒸去离子水。 HitachiH一600透射电镜；HitachiF一4500型荧光分光光度计：BeckmanDU。7400型紫外一可 见分光光度计。 2结果与讨论 2．1表面氨基化的荧光纳米粒子的合成与表征 四羧基铝酞菁分子具有羧基功能团，可以通过酰胺化反应将其修饰至qAPTEOS上，成为功能 到100nm左右范围内可调的纳米粒子，且具有较好的分散性。 2．2复合纳米粒子的光谱性质 带与Q带的相对强度发生了变化。荧光激发峰的位置与形状，与A1CaPc相比基本保持不变，但 是发射峰的位置随着杂化的AIC4Pc摩尔比增大而不断红移，荧光纳米粒子的荧光强度经过一个最 大值后，会出现下降。Si02基质能隔开一定的发光团，但是随着染料浓度增加，还是会发生二聚 现象。实验中选择最佳染料含量的荧光纳米粒子作为标记粒子。 2．3抗体与荧光纳米粒子的偶联 荧光纳米粒子通过双功能试剂戊二醛直接和抗体偶联。透射电镜实验表明，荧光纳米粒子的 活化和生物分子的固定并不会导致荧光纳米粒子的自聚现象，荧光纳米粒子一抗体复合物仍是分 散的颗粒，荧光测定同时表明，荧光纳米粒子一抗体复合物的荧光性质与荧光纳米粒子基本保持 一致。当抗体浓度为100 的6倍，这表明荧光纳米粒子有可能提高生物检测的灵敏度。 2．4夹心型荧光免疫分析人IgG ’通讯联系人 2006年11月 第四届海峡两岸分析化学学术会议论文集 湖北·武汉 考察了基于荧光纳米粒子标记测定人lgG的工作曲线，IgG浓度在0--一500ng／mL范围内与体系 的相对荧光强度呈良好线性关系，线性回归方程为Y=I 为0．990(n=7)，检测限为1．6 ng／mL(LOD=30／S)。 3结论 本方法制各简单易行，且方法的适用性强，可根据需要合成各种荧光纳米粒子。本实验的研 究结果不仅拓宽了红区荧光染料的应用范围，而且为发展新的生物标记荧光探针提供了新的思 路，具有较重要的参考价值。 参考文献： [1]陈发普，许德余．有机化学，1990，lo(6)：550-553． and ofaNovel ApplicationRed—Region Preparation FluorescentSilica in NanoparticlesImmunoassays Chen Xiao—lan”，ZouJian—li，LiZhong．ba02 and 1 of of Chemical Xiamen 36 Chemistry EngineeringUniversity,Xiamen005； (1．DepartmentChemistry,College 2．Fisheries University,Xiamen