新型核酸探针苯并菲咯啉衍生物的合成及应用.pdf

v01 and’ ectral July,E006‘268 爹22 06 Sp a与nd耋谱分ys析issr Analysis 6卷群背年7月 毒c谱troectroscopyc学op 新型核酸探针苯并菲咯啉衍生物的合成及应用 郭隆华，邱彬，陈国南’ 食品安全分析与检测技术(福州大学)教育部重点实验室．福州大学化学系，福州福建350002 摘要 吖啶酮类和郐菲咯啉类化合物都是较好的DNA分子荧光探针，文章结合上述两类化台物的特点， 合成了2一甲基一12H：苯并一1，10_菲咯啉一7m(m-BPO)，这种化合物同时具有吖啶酮和邻菲咯咻韵母体结构单 元，并具有很强的荧光发光效率，其与DNA的结合稳定，DNA的加入对这种合成产物的荧光猝灭作用明 显，并在一定范围内呈良好的线性关系，由此建立了定量测定DNA的一种新的荧光分析方法，同时研究了 其与蛋白质的相互作用。 主题词分子荧光探针；苯并菲咯啉衍生物；DNA；蛋白质 中围分类号：0657．3文献标识码：A 文章编号2006)07—0267—02 1．3工作曲线及线性范腑 1实验部分 依实验方法测定DNA工作曲线，如图1所示，ctDNA 的线性响应范围为：1．5～lOng·nlL，回归方程为：J= 一7．6357f+135．13．r=0．996 1．1苯并菲咯啉衍生袖的台成 4，检测限为0．5嵋·mL-1。 苯并菲咯啉衍生物的合成分为以下几步，第一步是乌尔 曼反应【“，即邻卤苯甲酸及其衍生物与相应的8-氨基喹啉反 Bongui口。 1 应生成N_(8一喹啉基)邻氨基苯甲酸，Jean-bernardd 等人以异丙醇为溶剂，以醋酸铜和醋酸钾为催化剂，在89 暑 ℃下合成出M(8一喹啉基)邻氨基苯甲酸衍生物，所需反应时 翟 间长(24h)，且产物分离困难。本文考虑到合成苯并菲咯啉 蓦 与合成吖啶酮反应原理上的类似性，受Pellon[“等人合成吖 啶酮衍生物的启发，以DMF为溶剂，以碳酸钾和铜粉为催 化荆，在155℃下台成N_(8-喹啉基)邻氨基苯甲酸衍生物， 400 4∞ 黜 进而以浓硫酸闭环生成相应的苯并菲略啉衍生物。苯并菲咯 Wavelengthtnm Flmeeneefor F嘻1 speetrsrelationship 啉衍生物的合成中最关键的一步是N_(8一喹啉基)邻氨基苯 betweenDNAandm-BPo 甲酸及基衍生物的合成，反应所用溶剂、反应温度以及催化 1；Fluorescencespectrum；2：Calibrationturtle 剂的用量对产率都有较大影响。 c。㈣一2 1．2 DNA定量检测条件优化 m-BPO的最佳激发波长为286nm，最佳发射波长为411 1．4 m-BPO与蛋白质的相互作用 nm。