化妆品微生物检验及安全技术规范比较分解.ppt

结果报告 凡在上述选择平板上有可疑菌落生长，经染色镜检，证明为革兰氏阳性葡萄球菌，并能发酵甘露醇产酸，血浆凝固酶试验阳性者，可报告被检样品检出金黄色葡萄球菌。 霉菌和酵母菌 霉菌和酵母菌数测定（Determination of molds and yeast count）化妆品检样在一定条件下培养后，1g或1mL化妆品中所污染的活的霉菌和酵母菌数量，藉以判明化妆品被霉菌和酵母菌污染程度及其一般卫生状况。 本方法根据霉菌和酵母菌特有的形态和培养特性，在虎红培养基上，置28℃±2℃培养5d，计算所生长的霉菌和酵母菌数。（5-50） 革兰氏染色 说明： （1）铜绿假单胞菌为专性需氧菌，能产生绿色水溶性色素，所以在SCDLP中生长在液面，培养基成绿色。 （2）氧化酶试验原理：铜绿假单胞菌含有细胞色素氧化酶，该酶是细胞色素呼吸酶系统的最终呼吸酶。具有氧化酶的细菌，首先使细胞色素C氧化，再由氧化型细胞色素C使对苯二胺氧化，生成有色（如粉红色或紫红色）的醌类化合物。 （3）绿脓菌素试验原理：铜绿假单胞菌能产生水溶性青脓素和绿脓素，能被氯仿提取；同时能产生红脓素，能溶于盐酸。 （4）硝酸盐还原试验原理：铜绿假单胞菌能还原硝酸盐，并将硝酸盐分解产生氮气。 （5）42℃生长试验原理：致病性铜绿假单胞菌能在42℃条件下生长，同属的荧光假单胞菌和恶臭假单胞菌都不能生长。 （6）明胶液化试验：铜绿假单胞菌含有胶原蛋白酶，能分解明胶，使其液化。 * 化妆品微生物检验 化妆品因含有水分，油脂，蛋白质，多元醇等，为微生物的生长创造了良好的条件，造成产品变质。 为了抑制微生物的繁殖和消费者使用过程中的产品污染，往往在化妆品中加入防腐剂(尼珀尔金甲脂、乙酯、丙脂及苯氧乙醇等)，但不能过量。 因此，化妆品一方面为微生物的生长繁殖提供了良好的环境；另一方面由于防腐剂的应用又可抑制微生物的生长。 为了避免测试结果可能出现假阴性（实际应该生长或是污染了，由于防腐剂的存在而导致结果不生长或是结果偏小），需要添加中和剂。 化妆品中常用的中和剂 样品中： 国际方法：尼泊金酯类防腐剂的中和剂：吐温80（30g/L）和卵磷脂(3g/L)+普通肉汤。化妆品安全技术规范：培养基成分中直接有卵磷脂（1g）吐温80（7g）。（稀释法也能同步起到中和的效果） 生产用水中的余氯：每125ml水样中加入0.1mg硫代硫酸钠。（注意添加方式和使用范围） 化妆品卫生标准 微生物检验方法 （2015版化妆品安全技术规范） GB/T 7918.1-1987 化妆品微生物标准检验方法 总则 菌落总数 （2015版化妆品安全技术规范） GB/T 7918.2-1987 化妆品微生物标准检验方法 耐热大肠菌群（2015版化妆品安全技术规范） 粪大肠菌群：GB/T 7918.3-1987 化妆品微生物标准检验方法 铜绿假单胞菌 （2015版化妆品安全技术规范） GB/T 7918.4-1987 化妆品微生物标准检验方法 绿脓杆菌 金黄色葡萄球菌 （2015版化妆品安全技术规范） GB/T 7918.5-1987 化妆品微生物标准检验方法 金黄色葡萄球菌 霉菌和酵母菌：（2015版化妆品安全技术规范） 方法比较 侧重点 2007版化妆品卫生规范 2015版化妆品安全技术规范 仪器和设备 规格没有规定 有：天平/培养箱 样品采集 全部操作应在无菌室内进行，或在相应条件下，按无菌操作规定进行。 全部操作应在符合生物安全要求的实验室中进行 如检出粪大肠菌群或其它致病菌，自报告发出之日起该菌种及被检样品应保存一个月。 直接删除 如为5mL 则加到45mL 灭菌生理盐水，混匀后，制成1：10 检液。 直接删除 2007版化妆品卫生规范与2015版化妆品安全技术规范对比： 总则 总则重点 1.具有代表性。2.不少于2个包装单位的取样中共取10g或10mL。3.供检样品，应严格保持原有的包装状态。容器不应有破裂，在检验前不得打开，防止样品被污染。4.应置于室温阴凉干燥处，不要冷藏或冷冻。4.宜先取出部分样品做微生物检验。5.严格上微生物无复测一说。（可能的因素多），因此对微生物检验人员要求严格。6.生物安全开始重视。 详细操作步骤 侧重点 2007版化妆品卫生规范 2015版化妆品安全技术规范 菌落总数定义 嗜中温的需氧性菌落总数 需氧性和兼性厌氧菌落总数 TTC 121℃ /20min 高压灭菌 溶解后过滤除菌，或115℃高压灭菌20min WHO更改 粪大肠菌群（Fecal coliforms） 耐热大肠菌群 Thermotolerant coliform bacteria 大肠培养温度和培养时间 置44℃±0.5℃培养箱中培养24h～48h 置44.5℃±0.5℃培养箱中培