HPLC—ELSD法测定复方丹参滴丸中人参皂甙Rg1、Rb1和三七皂甙.doc

中药新药与临床药理. 2002, 13(3): 174-176 HPLC-ELSD法测定复方丹参滴丸中人参皂苷Rg1、Rb1和三七皂苷R1的含量 黄永焯，王宁生 (广州中医药大学临床药理研究所，广州510405) 关键词：@复方丹参滴丸／化学；人参皂苷／分析；三七皂苷／分析；色谱法，高压液相；@蒸发光散射检测器 摘要：目的: 建立复方分参滴丸中人参皂苷Rgl和Rb1，三七皂苷R1的含量测定方法。方法：应用高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD)，采用固相萃取技术对样品进行预处理，Hypersil NH2柱，流动相为乙腈-异丙醇-10mmol/L醋酸铵水溶液 (冰醋酸调ph 5.0)(15:4:1)；流速：0.6mL·min-1，测定了复方丹参滴丸中人参皂苷Rg1、Rb1，和三七皂苷R1的含量。结果：该方法测定人参皂苷Rg1、Rb1，和三七皂苷R1的线性范围为1.0～10.0μg， 其加样回收率为95.3～100.4%，日内精密度≤2%、日间精密度≤4%。结论: 方法简便准确，可为三七制剂的含量测定方法提供借鉴。 中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1003-9783(2002)03-0174-03 复方丹参滴丸由丹参、三七和冰片等三味中药，经科学方法提取有效成分精制而成，是治疗心血管疾病的常用药。其中三七Panax Notoginseng (Burk.) F. H. Chen是我国名贵的中药材，其主要活性成分达玛烷系四环三萜类皂苷具有多种显著的药理作用，含三七的复方制剂常以其作为指标成分进行含量测定。 采用高效液相色谱—蒸发光散射检测法对复方丹参滴丸中人参皂苷Rg1、Rb1和三七皂苷R1进行了含量测定。在样品预处理中，采用固相萃取技术(SPE)直接对样品水溶液进行净化处理，并采用NH2柱，以乙腈-异丙醇-10mmol/L醋酸铵水溶液[冰醋酸调PH 5,0](15:4:1)为流动相的RP-HPLC法，可取得满意的结果。 1仪器与试药 Waters 515高效液相色谱仪，Alltech500蒸发光散射检测器，Waters Millennium32色谱工作站。安捷伦AccuBOND II ODS SPE柱(500mg，6mL)。 人参皂苷Rg1和Rb1，三七皂苷R1对照品(中国药品生物制品检定所)，复方丹参滴丸(天津天士力公司)，乙腈（Merck色谱纯）Rb1。 2. 3 线性关系 分别精密称取人参皂苷Rg1，和Rb1，三七皂苷R1对照品适量，用甲醇溶解配制成0.2mg·mL-1的溶液，取此溶液50，40，25，10，5μL依次进样，按色谱测定条件，测得人参皂苷Rg1和Rb1，三七皂苷R1的峰面积，用最小二乘法以进样量(μg)对数(lgX)对峰面积对数(1gY)进行线性回归，回归方程分别为： Rg1：1gY＝6.1986+1.2751 1gX (r2＝0.9987) R1：1gY＝6.1690+1.27851 1gX (r2＝0.9996) Rb1，：1gY＝6.0608+0.2254 lgX (r2＝0.9998) 线性范围为1.0～10.0μg。 2. 4 样品测定 取样品供试品溶液在上述色谱条件下测定，结果见表1。 表1 样品测定结果 （N=3） 批号 人参皂苷Rg1 人参皂苷Rb1 三七皂苷R1 含量/(mg·g-1) RSD% 含量/(mg·g-1) RSD% 含量/(mg·g-1) RSD% 980513 2.2467 1.9 2.4294 0.4 1.0525 2.2 991016 3.2656 0.8 3.5655 2.2 1.2370 1.9 000431 3.0248 0.6 3.1051 0.8 1.2564 2.1 2. 5精密度试验 日内精密度试验：取对照品溶液适量连续进样5次，测得各峰面积，计算RSD。日间精密度试验：取对照品溶液适量连续进样5d．测得各峰面积，计算RSD。结果见表2。 表2 HPLC-ELSD法测定人参皂苷Rg1和Rb1、三七皂苷R1的日内和日间精密度(N＝5) 测定 成份 进样量 /μg 日内精密度 日间精密度 峰面积 RSD% 峰面积 RSD% Rg1 1 1544552?9346 1.9 1541019?7738 1.8 598377 1.667538 3.0 886013 0.826835 1.4 R1 1 1476906?3292 0.9 1461088?9677 3.4 5