无菌检查法标准操作课程.doc

文件名：无菌检查操作编号：SOP-QC--A3 起草人： 审核人： 批准人： 起草日期： 审核日期： 批准日期： 颁发部门：质量管理部 发布日期： 实施日期： 分发范围：QC 目的 建立一个无菌检查法标准操作程序，保证实验的准确性、可靠性。 范围 适用于原料、辅料及成品的无菌检查。 职责 微生物检验员遵照执行。 内容2?25°C、避光的环境，若保存于非密闭容器中，一 般 在 3 周内使用；若保存于密闭容器中，一般可在一年内使用。 4.1.1.1 硫乙酵酸盐流体培养基 胰酪胨 15. 0g 氯化钠 2. 5g 酵母浸出粉 5. 0g 新 配 制 的 0. 1 % 刃 天 无水葡萄糖 5.0g 青 溶 液 1.0ml L-胱氨酸 0. 5g 琼 脂 0. 75g 硫乙醇酸钠 0.5g 水 1000ml (或硫乙醇酸） （ 0.3ml) 除葡萄糖和刃天青溶液外，取上述成分混合 ，微温溶解 ，调节 p H 为弱碱性，煮沸 ，滤清 ，加入葡萄糖和刃天青溶液，摇匀，调节p H , 使 灭 菌 后 在 25℃的 p H 值为7.1 土0.2。分装至适宜的容器中，其装量与容器高度的比例应符合培养结束后培养基氧化层（ 粉红色)不超过培养基深度的 1/2。灭菌。在供试品接种前，培养基氧化层的高度不得超过培养基深度的1/5，否则 ，须经 100°C水浴加热至粉红色消失（不释过2 0分钟） ，迅速冷却 只限加热 一次，并防止被污染。 除另有规定外 ，硫乙醇酸盐流体培养基置 30? 35C培养。 4.1.1.2 胰酪大豆胨液体培养基 胰酪胨 1 7 . 0g 氯化钠 5.0g 大豆木瓜蛋白酶水解物 3. 0g 磷酸氢二钾 2. 5g 葡萄糖/无水葡萄糖 2. 5g/2. 3g 水 1000m l 除葡萄糖外，取上述成分，混合 ，微温溶解，滤过，调节 p H 使灭菌后在2 5℃ 的 p H 值 为 7. 3±0. 2，加入葡萄糖，分装 ，灭菌 。 胰酪大豆胨液体培养基置20?2 5 ℃培养。 4.1.1.3 中和或灭活用培养基 按上述硫乙醇酸盐流体培养基或胰酪大豆胨液体培养基的处方及制法，在培养基灭菌或使用前加入适宜的中和剂、灭活剂或表面活性剂，其用量同方法适用性试验。 4.1.1.4 0.5% 葡萄糖肉汤培养基(用于硫酸链霉素等抗生素的无菌检查） 胨 1 0 . 0g 氯化钠 5 . 0g 牛肉浸出粉 3 . 0g 水 1000m l 葡萄糖 5. 0g 除葡萄糖外，取上述成分混合，微温溶解，调 节 p H 为弱碱性，煮沸 ，加入葡萄糖溶解后，摇匀 ，滤清 ，调节pH使灭菌后在 25℃的p H 值 为 7. 2士0.2，分装，灭菌。 4.1.1.5 胰酪大豆胨琼脂培养基 胰酪胨 15.0g 琼脂 1 5 . 0g 大豆木瓜蛋白酶水解物 5.0g 水 1000m l 氯化钠 5.0g 除琼脂外，取上述成分，混合，微温溶解，调节 p H 使灭菌后在 25℃的p H 值为7.3士0.2，加入琼脂 ，加热溶化后 ，摇匀 ，分装，灭菌。 4.1.1.6 沙氏葡萄糖液体培养基 动物组织胃蛋白酶水解物 水 1000m l 和胰酪胨等量混合物 10. 0g 葡萄糖 20.0g 除葡萄糖外，取上述成分，混合 ，微温溶解，调节 p H使灭菌后在25℃的 p H 值为5. 6 士 0.2，加入葡萄糖，摇匀，分装，灭菌 。 4.1.1.7 沙氏葡萄糖琼脂培养基 动物组织胃蛋白酶水解物 琼脂 15.0g 和胰酪胨等量混合物 1 0 . 0g 水 1000m l 葡萄糖 40.0g 除葡萄糖、琼脂外，取上述成分，混合，微温溶解，调节 p H 使灭菌后在25°C的 p H 值 为 5. 6士0.2，加入琼脂，加热溶化后，再加入葡萄糖，摇匀 ，分装，灭菌。 4.1.2 培养基的适用性检查 无 菌 检 查 用 的 硫 乙 醉 酸 盐 流 体 培 养 基 和 胰 酪 大 豆 胨 液 体 培 养 基 等 应 符 合 培 养 基 的 无 菌 性 检 查 及 灵 敏 度 检 查 的 要 求 。 本 检 查 可