讲授-液相检测器讲义.ppt

检测器 紫外检测器 示差折射检测器 荧光检测器 电化学检测器 紫外检测器 紫外吸收检测器其检测原理和UV-Vis方法一样。只是，此时所采用的吸收池为微量吸收池，通常其光程为2-10mm, 体积约为1~10 ?L。具有灵敏度高，线性范围宽，对流速和温度不敏感等特点，它是液相色谱最常用的检测器。 HPLC分析中，约有80%的物质可以用紫外吸收检测器检测。 。在实际工作，紫外检测的主要参数是选择检测波长，它应考虑溶质和流动相的吸收特性，在选择测量波长时注意：溶剂必须能让所选择的光透过，即所选波长不能小于溶剂的最低使用波长 固定波长型 可变波长型 二极管阵列 固定波长型 结构紧凑 造价底 操作维修方便 灵敏度高 适用于梯度洗脱 可变波长型 紫外可见分光 选择性大 二极管阵列 同时检测全波长的信号定量的同时也可光谱定性 波长 可的松 氟美松 皮质酮 快速扫描—光电二极管阵列（PDA）检测所获得的三维色谱-光谱图 示差折射检测器 示差折射检测器是通过连续监测参比池和测量池中溶液的折射率之差来测定溶质浓度。由于折射率是物质的通用性质，示差折射检测器是一种通用型的整体性质检测器 原理：利用两束相同角度的光照射溶剂相和样品+溶剂相，利用二者对光的折射率不同，其中一束（通常是通过样品+溶剂相）光因为发生偏转造成两束光的强度差发生变化，将此差示信号放大并记录，该信号代表样品的浓度。 为通用型检测器，灵敏度为10-7g/mL。但对温度变化敏感(0.00X ℃ ），且不适于梯度淋洗。 光源 调零 光学零 参比 样品 平面镜 透镜 光电转换 记录仪 放大器 遮光板 荧光检测器 荧光检测器是一种很灵敏的, 有选择性的检测器, 其灵敏度比UV 高10~1000倍, 一般可测ppb级的化合物。它用于检测物质本身具有荧光或为了提高灵敏度将无荧光的物质衍生成荧光体。可用荧光检测的物质：如某些代谢物、食品、药物、氨基酸、多肽、胺类、维生素、石油高沸点馏分、生物碱和甾族化合物等。 电化学检测器 对于具有电活性的物质, 在液相色谱中可采用电化学检测器检测。它包括电导库仑、安培、极谱、电位和光电导等形式, 其中, 用得最多和最成功的是安培检测器 安培检测器 由恒电位仪和一薄层反应池（体积为1~5?L）组成。如图。 该检测器是利用待测物流入反应池时在工作电极表面发生氧化或还原反应，两电极间就有电流通过，此电流大小与待测物浓度成正比。 采用安培检测器时，流动相必须含有电解质，且呈化学隋性。它最适于与反相色谱匹配。但此检测器只能检测具有电活性的物质。 液相色谱常用检测器的一般性质 检测器 选择性 梯度洗脱 线性范围 检测限(g/ml) 敏感性 对流速 对温度 紫外 紫外吸收 可以 105 2×10－10 不敏感 低 示差 通用型 不行 104 2×10－7 不敏感 10－4 荧光 发荧光物质 可以 103 10－11 不敏感 低 电化学 电活性 不行 106 10－12 敏感 1.5% 色谱数据处理和色谱工作站 早期的色谱仪采用记录仪，通常是一种电子电位差计来记录色谱图。由色谱图量取两个最重要的色谱参数：保留值和峰面积。由于色谱分析的特殊性和电子技术的迅速发展，目前色谱分析普遍使用色谱数据处理机获得色谱信息。大多数色谱数据处理装置是由数字电子积分仪和微处理机系统组成。通过ADC转换器, 把模拟信号转换成数字信号, 然后再把峰持续时间内的数值贮存起来进行计算, 最后打印出分析报告。