第五章蛋白质的生物合成概要.ppt

2. 转肽--肽键的形成（peptide bond formation） 在70S起始复合物形成过程中，核糖核蛋白体的P位上已结合了起始型甲酰蛋氨酸tRNA，当进位后，P位和A位上各结合了一个氨基酰tRNA，两个氨基酸之间在核糖体转肽酶作用下，P位上的氨基酸提供α-COOH基，与A位上的氨基酸的α-NH2形成肽键，从而使P位上的氨基酸连接到A位氨基酸的氨基上，这就是转肽。转肽后，在A位上形成了一个二肽酰tRNA。 3. 移位（Translocation) 转肽作用发生后，氨基酸都位于A位，P位上无负荷氨基酸的tRNA就此脱落，核蛋白体沿着mRNA向3端方向移动一组密码子，使得原来结合二肽酰tRNA的A位转变成了P位，而A位空出，可以接受下一个新的氨基酰tRNA进入，移位过程需要EF-G，GTP和Mg2+的参加。 多肽链延伸的终止 多肽链的最后一个肽键形成后，携带新合成多肽链的肽酰-tRNA从A位转移至P位，终止密码（UAA、UAG或UGA）进入A位，在正常的细胞中没有和终止信号互补的tRNA。 在E.Coli中，有三种释放因子RF－1、RF－2和RF－3（RF：Release Factor）能够识别终止密码。释放因子RF－1可以与UAA和UAG结合，而RF－2能与UAA和UGA结合，RF－3与RF－1或RF－2结合形成异二聚体，协助它们的作用。RF－3也结合GTP。 当异二聚体在A位与mRNA结合后，改变了肽酰转移酶的活性，使得该酶能够水解肽酰-tRNA酯。伴随着GTP的水解和释放因子从核糖体的解离，最后的多肽产物从核糖体释放出来。70S核糖体解离为30S和50S亚基，为合成另一个多肽分子作准备。 蛋白质合成是个耗能过程，生成氨酰-tRNA时虽说是消耗了一个ATP，但实际上是两个高能磷酸键水解，移位和延伸时又各消耗了一个 GTP，所以每形成一个肽键都需要4个高能磷酸键的水解。 参见p628 四、蛋白质前提的加工 多肽的修饰： (1) 切除N末端的甲酰-fMet ； （2）信号肽的切除 ； （3）部分肽段的切除 ； （4）个别氨基酸残基的修饰； （5）糖基或辅基的加入 ； 2.多肽链的折叠： （1）形成-S-S-键加速折叠 ； （2）分子伴侣（监护分子）帮助折叠； 五、信号肽序列指导蛋白质定位 在真核生物中，许多加工修饰过程都是发生在特定的细胞器中。例如蛋白质的糖基化就发生在内质网和高尔基体中。真核生物的蛋白质合成发生在细胞质中，所以需要将新合成的蛋白质向不同细胞器的转移，这个过程称为蛋白质运输或寻靶（targeting）。　　 定向于特定亚细胞区的蛋白质都带有特殊的位置信号，这个信号就象信封上的地址。用于蛋白质寻靶的分子信号是一段氨基酸序列，即信号肽。 (p629) 信号肽常用来特指指导蛋白质跨过内质网的信号，从更广泛的意义上讲，信号肽指的是指导蛋白质寻靶的任何一段连续的氨基酸序列。 使蛋白质定向于内质网的信号序列研究的最清楚。内质网信号肽的长度通常为10个氨基酸左右，大多数都是由疏水氨基酸残基组成，例如Leu, Val, Ile, Tyr,或Trp。典型的信号肽的N末端一侧含有一个带正电荷的氨基酸，例如Arg或Lys，而C末端一侧含有极性氨基酸或Ala。 作业（05-12-1） 一、简述tRNA二级结构的特点及其主要结构部分的功能。 答：tRNA的二级结构呈三叶草形，由四臂和四环组成：碱基配对部分称为臂，未配对部分称为环。主要结构部分的功能如下： 氨基酸臂：3’末端含有pCCA结构，功能为连接氨基酸； D环：含二氢尿嘧啶核苷酸残基，与氨甲酰- tRNA合成酶的结合有关； 反密码环：含反密码子，可与mRNA上的密码子相互识别； 可变环：大小有变化，是tRNA分类重要指标； TψC环：含有T、 ψ （假尿嘧啶核苷）和C残基的环。与核糖体的结合有关。 三叶草型结构特征： 氨基酸臂； D环：含二氢尿嘧啶核苷(dihydrouridine)酸残基; 反密码环：含反密码子； 可变环：大小有变化，是tRNA分类重要指标； TψC环：含有T、 ψ （假尿嘧啶核苷）和C残基的环。  二、参加原核生物DNA复制的酶有：①DNA聚合酶III；②解链酶；③ DNA聚合酶I； ④RNA聚合酶；⑤DNA连接酶。其作用顺序是： A. ④、③、①、②、⑤； B. ②、③、④、①、⑤； C. ④、②、①、⑤、③； D. ④、②、①、③、⑤； E. ②、④、①、③、⑤； * 第九章 蛋白质的生物合成 蛋白质的生物合成-翻译（transla