蒸发光检测器校准方法作业指导书讲义.doc

编号：JL13-理化-作业-121 蒸发光检测器校准方法 作 业 指 导 书 编写： 年 月 日 审核： 年 月 日 批准： 年 月 日 理化实验室蒸发光检测器校准方法作业指导书 1 使用范围 本规范主要适用于新制造、使用中或修理后的蒸发光检测器的校准。 2 引用文献 《液相色谱仪 ELSD 蒸发光散射检测器简介与校准方法研究》 广东省计量院 JJG705-2002《检定规程》 蒸发光散射检测器是上世纪90年代开始应用的一种新型通用性的HPLC质量检测器：其主要特点在对于没有紫外吸收的化合物，比如皂甙、内酯、糖类等化合物，在ELSD上会有响应,而且稳定性好,灵敏度高,可进行梯度洗脱分析。在我国中药、食品等检测领域有着广乏的应用。 JJG705-2002《检定规程》如；各功能键应完好，工作正常。 5.1.4 仪器的指示刻度和数字清晰，数字显示完整； 5.2 仪器技术性能 5.2.1 输液系统：输液管路接口紧密牢固，在规定的压力范围内无泄漏。 5.2.2流量设定值误差SS 和流量稳定性误差SR 应符合表1 的要求 5.2.3 梯度误差GC：不超过±3 %。 5.2.4柱温箱温度设定值误差ΔTC：不超过±2℃。 5.2.5温度稳定性TC：不超过1℃SS 和流量稳定性误差SRSS 5% 3% 2% SR 3% 2% 2% 注：1.最大流量的设定可根据用户使用情况而定。 2.对于特殊的、流量小的仪器，流量的设定可以根据用户使用情况选大、中、小三个流量，流动相的收集时间则根据情况适当缩减或延长。 6 计量器具控制 6.1校准的环境条件 6.1.1环境温度：（15～35）℃ 6.1.2相对湿度：≤80％7.1输液系统的检校 7.1.1泵耐压的检校 将仪器各部分连接好，以100%甲醇为流动相，流量为 1mL/min，按说明书启动仪器，压力平稳后保持10min，用滤纸检查各管路接口处应无湿迹。卸下色谱柱，堵住泵出口端（压力传感器以下），使压力达到最大允许值的90%，保持5min无泄漏。 7.1.2泵流量设定值误差SS、流量稳定性误差SR的检校 参照下表的要求设定流量，启动仪器，压力稳定后，在流动相出口处用事先清洗称重过的容量瓶收集流动相，同时用秒表计时，收集下表规定时间流出的流动相，在分析天平上称重，按下式计算SS和SR。 式中：FM--，流量实测值，mL/min； W2--容量瓶+流动相的质量，g； W1--容量瓶的质量，g； ρt--试验温度下流动相的密度，g/cm3； t--收集流动相的时间，min； --同一组测量的算术平均值，mL/min； FS--流量设定值，mL/min； Fmax--同一组测量中流量最大值，mL/min； Fmin--同一组测量中流量最小值，mL.min。 7.2梯度误差的检校 由梯度控制装置设置阶梯式的梯度洗脱程序，A溶剂为纯水，B溶剂为含0.1%丙酮的水溶液，B经由5个阶梯从0变到100%，如图1所示。将输液泵和检测器连接（不接色谱柱），开机以后以A溶剂冲洗系统，基线平稳后开始执行梯度程序，画出梯度变化曲线。求出A、B溶剂不同比例时的输出信号值（或记录仪读数），重复测量2次，计算平均值。从B溶剂的含量及对应的输出信号值（或记录仪读数），按下式计算梯度误差Gci，取Gci最大者作为仪器梯度误差。 式中：Gci--第i段梯度误差 ( % ) ； --第i段输出信号值（或记录仪读数）平均值； --各段输出信号（或记录仪读数）平均值的平均值。 图1 剃度误差检校示意图 梯度误差GC：不超过±3 % 。 7.3 柱箱温度设定值误差ΔTS和控温稳定性TC的检校 将数字温度计探头固定在柱温箱内，选择35℃和45℃（也可根据用户使用温度设定）进行检校。按仪器说明书操作，通电升温，待温度稳定后，记下温度计读数并开始计时，以后每隔10min 记录一次读数，共计7次，求出平均值。平均值与设定值之差为ΔTS，7次读数中最大值与最小值之差为控温稳定性TC。 7.4基线噪声和基线漂移的检校 仪器开机后，在室温下设定泵的流速为1%，按仪器规定的要求调节好载气（氮气）流速和漂移管温度，设定合适增益等，待仪器稳定后，采用不进样方式运行30min，测量仪器的噪声和漂移。 7.5 检出限配制25ug/L的葡萄糖水溶液，每次进样量20μL，测量3次取平均值；检出限的公式可依据 JJG705-2002《液相色谱仪检定规程》中规定的最小检测浓度公式： CL=2HNC/H(CL为最