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酶蛋白的结构与功能
金属离子: 辅助因子 有机小分子 例一: 过氧化氢酶 2H2O2 2H2O + O2 铁离子 过氧化氢酶比铁离子的催化效率高1011倍。 例二: 淀粉 糊精 麦芽糖 葡萄糖 体内:唾液淀粉酶 体外:强酸(煮沸15分钟) 酶分子中可以作为广义酸、碱的基团 广义酸基团 广义碱基团 (质子供体) (质子受体) 4) 共价催化 5) 金属离子催化作用 金属离子可以和水分子的-OH结合,使水显示出更大的亲核催化性能。 ?电子传递中间体 许多氧化-还原酶中都含有铜或铁离子,它们作为酶的辅助因子起着传递电子的功能。 一、底物浓度—[S]对反应速度的影响 反应初: [S]很低时,[S]增加,V增加,且与[S]呈正比。 反应中: [S]增加,V增加,但V增加缓慢,非正比关系。 反应末: [S]浓度很高时,[S]再增加,V保持不变。 米(曼)氏方程 反应初: [ S ]很低时 [ S ] << Km, V0与底物浓度呈正比。 反应中: [ S ] = Km,V0是Vmax的一半 反应末: [S] Km, V0≌Vmax 米氏常数的意义 二、抑制剂对反应速度的影响 (一)可逆性抑制 1.竞争性抑制 抑制剂与底物竞争性地与酶的活性中心结合,抑制了酶的活性。 其特点是: 1)抑制剂的结构与底物相似 2)增大底物的浓度可降低或解除抑制 可逆抑制作用的动力学特征 加入竞争性抑制剂后,Km 变大,酶促反应速度减小。 2.非竞争性抑制 抑制剂I不影响底物S与酶E的结合,抑制剂I可以和底物共同与酶E结合生成ESI复合体。一旦形成ESI复合物,再不能释放形成产物P。 (二)不可逆性抑制作用 不可逆性抑制作用的抑制剂,通常以共价键方式与酶的必需基团进行不可逆结合而使酶丧失活性。 有机磷杀虫剂能专一作用于胆碱酯酶活性中心的丝氨酸残基,使其磷酰化而抑制酶的活性。 当胆碱酯酶被有机磷杀虫剂抑制后,神经末稍分泌的乙酰胆碱不能及时分解,乙酰胆碱会导致胆碱能神经过度兴奋的症状。 解磷定等药物可与有机磷杀虫剂结合,使酶和有机磷杀虫剂分离而复活。 非竞争性抑制 加入非竞争性抑制剂后,Km 虽然不变,但由于Vmax减小,所以酶促反应速度也下降了。 三、温度对反应速度的影响 温度较低时,温度升高反应速度加快,超过一定温度,温度升高反应速度反而减慢。 反应速度达到最大时的温度称为最适温度。 高温使酶变性,低温可使酶的活性降低,但不破坏酶分子构象 高温: 使酶变性,因破坏了酶分子构象,使酶的活性降低。 低温: 可使酶的活性降低,但不破坏酶分子构象,温度升高仍可恢复活性。 四、pH 对反应速度的影响 pH 过小或过大,都可使酶蛋白变性而失活,使反应速度降低。 酶促反应速度最大时的pH 称为最适pH 。 五、激活剂对反应速度的影响 激活剂(activator) 使酶由无活性变为有活性或使酶活性增加的物质。 ? 必需激活剂 (essential activator) ? 非必需激活剂 (non-essential activator) 三、同工酶 酶的特征性物理常数,表示与底物的亲和力, Km值等于酶反应速度为最大速度一半时的底物浓度。 Km值只与酶的性质、酶所催化的底物和酶促反应条件有关,与酶的浓度无关。 酶的种类不同,Km值不同。 米氏方程说明了酶促反应与底物浓度的定量关系,也证实了中间复合物学说。 凡能使酶的活性下降而不引起
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