杂交三倍体太平洋牡蛎群体发育过程中的倍率变化.pdf

福建蠹n 第三届海洋生物高技术论坛 2005．08．19-23 杂交三倍体太平洋牡蛎群体发育过程中的倍率变化+ 王昭萍米 姜波 于瑞海 李慷均4 (中国海洋大学，青岛市鱼山路5号，266003) 摘要：流式细胞仪检测倍性发现在幼虫期、稚贝期、幼贝期以及1龄时，杂交三倍体太平 洋牡蛎群体三倍体率均为100％，但随着牡蛎的生长和发育成熟，倍性逐渐出现分化，至2 龄时三倍体率降低为84．48％，二倍体率达到了11．21％，2n／3n嵌和体的比例为2．56％。对 繁殖季节前后杂交三倍体群牡蛎的倍性变化进行了跟踪检测。结果发现经过繁殖期后，在 96个个体中有9个个体的倍性发生了变化，占总检查数的9．38％，其中8个由三倍体变成 2n／3n嵌合体，1个由三倍体直接变成二倍体。生长测量表明，杂交群体中的三倍体群体在 壳长、壳宽、壳高和体重等方面都明显大于二倍体群体(P0．01)，在壳长和体重方面明显 优于嵌合体群体(P0．05)；而嵌合体在体重和壳宽两方面明显大于二倍体(P0．05)。 关键词：太平洋牡蛎；杂交三倍体；三倍体率；嵌合体 三倍体由于不育性具有生长快、肉质好等优点【l以】，并且能形成繁殖隔离，不会对养殖 环境造成品种污染，有利于保护生物多样性【4】。 目前，三倍体太平洋牡蛎主要有两种生产方法：即抑制受精卵第二极体的释放和利用四 倍体与■倍体杂交产生三倍体。其中通过四倍体(T)与二倍体(D)杂交产生三倍体，三倍 体率可高达100％，方法简单，操作方便，避免了理化处理对胚胎发育的影响，能提高胚胎 孵化率和幼虫成活率[5】，是实现三倍体太平洋牡蛎产业化生产的一条切实可行的途径，具有 巨大的应用价值。 在太平洋牡蛎【6】、栉孔扇贝‘71和菲律宾蛤仔‘81诱导三倍体的实验中曾经发现三倍体率在不 同的阶段存在变化。目前，关于四倍体与二倍体杂交产生三倍体的文献还很少，关于杂交三 倍体的倍率变化报道则更为少见。在已有的文献报道中杂交产生的三倍体率在幼虫期、稚贝 期、和幼贝期都是100％[59】，然而杂交三倍体在养殖过程中倍率是否稳定，在经过了一个或 是几个繁殖季节后，三倍体率是否仍然保持不变，三倍体倍率如果发生变化，原因是什么? 现在还缺乏对养殖的杂交三倍体太平洋牡蛎倍性长期、系统、完整的观察。三倍体率是否稳 定，是关系着能否发挥三倍体养殖优势的关键，更关系到三倍体能否起到保护生物多样性的 作用。本研究目的在于通过对杂交太三倍体平洋牡蛎从胚胎至2龄几个关键发育时期的三倍 体率进行系统的检测，研究杂交太平洋牡蛎三倍体群的倍率变化规律，探讨三倍体倍率变化 的原区I。 ++863高技术项目资助(2004AA623820) 8通讯作者。EmaiJ：zpwang@ouc．edu．cn 239 福建爱n 第三届海洋生物高技术论坛 2005．0819．23 1材料和方法 1．1杂交三倍体太平洋牡蛎的获得 2001年5月通过四倍体雄体与二倍体雌体杂交生产三倍体牡蛎(以2n与2n杂交作为对 照)，其中四倍体(4n)雄性牡蛎来自美国新泽两，其倍性经流式细胞仪检测确定，二倍 体(2n)牡蛎一部分取自文登海区；一部分取自威海养殖海区。 1．2倍性检测 CCAII)测定。分别在在D形幼 杂交产生的太平洋牡蛎的倍性通过流式细胞仪(Partec 及2龄(2003年5月)时取样检测倍性。为了避免海区中自然孵育的二倍体牡蛎苗附着导致 三倍体率下降，在1龄倍性检测后，将附着在一起的三倍体太平洋牡蛎分开成为单体，放在 网笼中培养。从2龄开始，随机选取127个牡蛎单体标记，对其繁殖季节前后(2003年5月～ 2003年9月)的倍性变化进行跟踪观察及测量各个群体的生物学指标。使用游标卡尺测量牡 蛎壳的生长，以壳顶至壳缘的最大距离作为壳长，以壳背腹缘问的最大距离作为壳高，以两 壳间的最大距离作为壳宽。利用电子称测量牡蛎的体重。 2结果 2．1不同发育阶段阶段三倍体率的变化情况 通过流式细胞计检测不同生长阶段的三倍体