杂色鲍♀×盘鲍♂杂交家系的AFLP遗传分析.pdf

福建谩n‘ 第三届海洋生物高技术论坛 2005．08．19-23 杂色鲍早×盘鲍杏杂交家系的AFLP遗传分析 蔡明夷1，柯才焕h，王志勇”，王桂忠1，游伟伟1，任鹏2 (1厦门大学海洋系，海洋环境科学国家重点实验室厦门361005) (2集美大学水产生物技术研究所厦门361021) 摘要：为了确定杂色鲍早×盘鲍古杂交子代与双亲的遗传关系，本研究培育了杂色鲍；。×盘鲍。 杂交家系，并应用AFLP标记对杂交家系进行遗传分析。结果表明：杂交F1出苗率很低， 为0-0．13％。杂交F1的AFLP指纹图谱与母本相似，三个家系杂交F1单态位点全部来自母 传相似性分析结果为：母本与父本的遗传距离为1．471—1．492；母本之间的遗传距离为 家系均先与母本聚为一类，然后3个家系再聚为一类，与父本的亲缘关系较远。可见，杂交 F1与母本的遗传距离小于母本之间的遗传距离，与母本有极高的遗传同质性，为雌核发育个 体：另一方面，根据PSL位点可以初步推测，平均每个个体约含有0．44士0．50％父本基因。 关键词：种间杂交，遗传分析，AFLP，杂色鲍，盘鲍 间杂交后代可能是异源二倍体、异源二倍体或异源四倍体，不同的遗传本质在遗传育种 中有不同的虑川价值。冈此，研究和利用种间杂交，首先要确定种问杂交子代的遗传本质。 杂色鲍(Haliotisdiversicolor)币ll盘鲍(H 进行杂色鲍和盘鲍种间杂交试验，并培育了Fl。课题组对杂色鲍旧×盘鲍{¨_杂种F1形态学及 分子遗传学分析结果表明，杂交Fl在形态和遗传上的特点均接近母本，推测为雌核发育后 代。为了确定杂色鲍早×盘鲍6杂交子代与双亲的遗传关系，本研究培育了杂色鲍×盘鲍： 杂交家系，并应用AFLP标记对杂交家系及其亲本进行遗传分析。 材料与方法 杂交家系的培育 2004年8月9日于福建省东山县海田公司培育杂交家系。实验j4j杂交亲本杂色鲍和盘鲍 系分别从台湾省和日本引进并已在该公司养殖数代的成熟鲍。亲鲍阴干1h后，按只分装丁． 催产盆中，标上顺序号，每小时换紫外线水催产。为了实现两种亲鲍同步排放，杂色鲍分为 二批催产，盘鲍待第一批杂色鲍产卵时开始催产。取刚排放的卵子和新鲜精液进行单对组合 杂交，得到5个杂交家系，母本分别为5只雌性杂色鲍，父本同为1只雄性盘鲍。幼体孵化 后，优选上层幼体，计数后投入200L有硅藻薄膜的水族箱中培育，分别编号为 525 福建曩门 第三届海洋生物高技术论坛 2005．08．19．23 杂交家系的AFLP遗传分析 Basic Excel中以Visual 将AFLP指纹图谱转换成1和0构成的数字矩阵，在Microsoft data 语言编制的程序(AFLP analyzer，计算各家系个体之间，及个体与亲本之间的遗传距离， 输入MEGA3．0软件中，川UPGMA方法进行聚类分析，构建聚类图。 为个体i与i共有的片段的数董，Ⅳf，M分别为个体i与j各具有片段的数量。 遗传距离D一一InS 结果 杂交家系早期发育受精率和成活率比较 表l杂色鲍早×盘鲍6杂交家系受精率和2月龄出苗数 Tabell Fertilizationand2mollsurvivalrateofSJ families hybrid AFLP扩增结果 条和122条带。父本与3个母本共有条带分别为27、26和27条，父本和母本特异位点分别 有近卣个(图1) 全部来自母本，比例分别为85．61％，88．89％、95．97％。杂交Fl的多态位点包括下述三类： 基因分离位点(MSL)、父本特异性何点(PSL)和非亲位点(NPL)(表3)。 母本基冈