《生物技術制药》实验指导书.doc

生物技术制药 实 验 指 导 王金华 苏华伟 西南林学院资源学院 生物技术教研室 二OO三年十二 月 目 录 序 言．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．ii 一、生物药物原料的选择、处理与保存．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．1 二、包埋法制备固定化细胞．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3 三、吸附层析提取鸟巢菌素．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5 四、液相层析分离、纯化蛋白质类药物．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7 五、半成品药物质量检测———蛋白质含量测定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10 六、蛋白质药物相对分子量测定——SDS．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．13 七、蛋白质药物纯度检测——SDS．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18 八、抗体诊断——玻片直接凝集法检测血型．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20 九、单克隆抗体的制备．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22 十、植物药物制备技术实验十一大蒜细胞SOD的提取与分离动物药物制备实验卵磷脂制备…………………… 附 录．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．37序 言 生物技术是一门具有悠久历史、又与现代科学和技术密切结合的学科。20世纪70年代以来，DNA重组技术等分子生物学技术的不断发展，赋予了生物技术崭新的内容，使之成为真正的高技术领域——现代生物技术。它促使工农业生产和医疗卫生事业发生了革命性的变化，特别是用于医疗卫生事业的医药生物技术的发展，使疾病的治疗和诊断、药物的研究和生产以及其他卫生保健事业出现了崭新的局面。其中最成功的是生物技术用于新型药物的研制，已有近30种基因工程药物投放市场，产生了巨大的社会效益和经济效益，对新药的研制、开发以及未来医药工业结构调整产生重大影响。 21世纪是生命科学的世纪，21世纪是新材料和先进制造技术迅速发展和广泛应用的时代，21世纪是高效、洁净和安全利用新原料的时代，21世纪是人类向空间、海洋、地球内部不断拓展的世纪，21世纪是自然科学发生重大变革、取得突破性进展的时代。医药工业则被誉为21世纪的“朝阳产业”，特别是现代生物技术的迅速发展，更促进了当今世界制药工业的迅猛发展。科学技术的发展、新技术的不断涌现对我国这样的发展中国家来说，既是挑战，也是机遇，而能否抓住发展机遇关键在于提高全民族的科学文化水平，造就一支具有科学精神、懂得科学方法、具有知识创新和技术创新能力的高素质劳动者队伍。所以，发展和普及科学知识、弘扬科学精神、提倡科学方法是我们应对世纪挑战的首要策略。为此，1999年8月，江总书记在视察中国科学院大连化学物理研究所时进一步强调了科普工作者的重要性：“在加强科技进步和创新的同时，我们应该大力加强全社会的科学普及工作，努力提高全民族的科学文化素质。这项工作做好了，就可以为科技进步和创新提供广泛的群众基础。”所以我们应加速现代生物技术制药的人才培养，以迎接21世纪的挑战。 生物药物包括从动物、植物、微生物、人和各种海洋生物中制取的以及运用现代生物技术产生的各种天然生物活性物质及其人工合成或半合成的天然物质类似物。它在医疗上具有药理活性高、针对性强、毒性低、副作用小疗效可靠及营养价值高等鲜明、显著的特点，已越来越受到人们的青睐和重视。而近半个世纪生命科学的飞速发展给生物药物的开发和利用赋予新的生命，使生物药物成为当今发展最快、影响最大的药物之一。 本书着重介绍生物技术制药过程中涉及的重要方法和技术，可根据时间和要求情况，选用部分实验。每个实验后面都附有相关的思考题，书后编有附录，可供读者查阅。 王金华 主编 2003年12月于昆明 实验一 生物药物原料的选择、处理与保存 一、目的要求 了解各种不同生物药物原料的来源，学习并掌握各种原料的选择原则、处理及保存方法。 二、基本原理 生物药物原料以天然的生物材料为主，包括人体、动物、植物、微生物和各种海洋生物等。生物药物的提取与分离方法因为原材料、药物的种类和性质的不同而有很大差异。因此在选择时应注意选择有效成分含量高、原料新鲜、来源丰富、杂质含量少的原料，还要选择最佳采集时间。 原料的处理依原料种类的不同而不同。动物原料采集后要立即处理，去