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代DNA通用合成柱
Embed? DNA通用合成柱
概述
CPG (Controlled Pore Glass)Frits:含可控孔径的玻璃球的滤芯,是CPG与UHMW-PE(超高分子量聚乙烯)或HDPE(高密度聚乙烯)粉末烧结而成。是深圳市逗点生物技术有限公司的专利技术。第二代CPG 合成柱Embed? DNA通用合成柱 ,把用于DNA合成的CPG镶嵌到筛板中,使合成溶剂流道固定,流动相在CPG内部的孔和UHMW-PE颗粒之间的孔中流动,完成各种化学反应。大大提高了合成产物的纯度。合成的引物不经过纯化就能直接用于定量PCR实验。
材质
CPG(Controlled Pore Glass)微孔玻璃小球,二氧化硅材质,现在被广泛用作固相合成寡核苷酸的支持。CPG球体内部有很多不规则的孔道孔道的大小称为孔径选择孔径500?和1000?的CPG用于DNA合成也可以选择其它孔径筛板通常用UHMW-PE或HDPE粉末烧结而成。UHMW-PE粉末在一定的温度下处于半融化状态,颗粒之间搭桥形成一定的孔径。筛板的作用是阻挡CPG不漏下来而合成试剂能够通过。空柱管为聚丙烯注塑而成。CPG Frits是CPG和UHMW-PE或HDPE粉末烧结成。UHMW-PE颗粒包裹并固定CPG颗粒,UHMW-PE颗粒之间搭桥形成一定的孔径。流动相在CPG内部的孔和UHMW-PE颗粒之间的孔中流动,完成各种化学反应。
特点
和的DNA合成柱比较,CPG Frits合成柱是一个进步
1、高效率,纯度更高,突变率更低。第一代的合成过程,试剂进入CPG孔隙主要靠渗透作用,效率很低,时间较长。每个步骤加试剂的动作,会使CPG不断旋转,降低了合成试剂在孔隙中流动的效率?。深圳逗点生物技术有限公司的嵌合技术使合成溶剂流道固定,试剂和linker接触更稳固,反应更充分,清洗更彻底,每个合成步骤更高效,提高了合成产物的纯度,突变率更低。在大多数情况下,合成的引物不经过纯化就能直接用于后续实验。
2、节省合成试剂,更环保。经典的第一代DNA合成柱容纳试剂的空间较大,而第二代的Embed? CPG?Frits只有孔隙的体积是容纳试剂的体积。当试剂流过时,第一代是通过渗透作用到达CPG孔的内部与外部,试剂耗损率大,第二代是固定通道,大大节省了试剂,保护了环境。深圳逗点生物技术有限公司Embed TMCPG?frits优化了设计,体积进一步减小。
3、合成总体成本低。Embed TMCPG frits要节省30%-50%的成本。在试剂(尤其是单体)耗损上,第二代CPG?Frits比第一代产品要少;进一步降低试剂损耗需要降低CPG的使用量。我们发现在微克的水平要把CPG分配均匀非常困难,批内和批间差异很大,低规格LOADING值很难通过减少CPG用量来实现。第二代CPG?Frits?很好解决了这个问题。
4、提高可靠性,减少出错概率。第一代产品分为A\T\C\G四种,第二代为通用合成柱,用Universal?linker,只有一种,库存上,第二代减?少4倍,且操作上,不会因区分颜色而产生出错率。
5、提高合成速度,节省了总体时间。深圳逗点生物技术有限公司Embed TMCPG?frits,在第一个循环去掉了DMT的保护,从而减少了这一步骤的反应时间,提高了合成速度。且Embed TMCPG?frits,由于体积小,能够将CPG含量降到最低,仅为0.5-1mg,偶合时,单体用量仅为15-20μL,耦合时间在30秒内完成,从而缩短了整个合成的时间。合成的引物不经过纯化就能直接用于后续实验,也大大节约了总体时间。
6、超强的疏水环境,保护合成过程。DNA合成需要在无水环境进行。深圳逗点生物技术有限公司的Embed TMCPG?frits使用的UHWM-PE,具有极强的疏水性,CPG被包裹其中。DNA合成过程中,试剂不能接触水,UHWM-PE材质的使用无疑能使合成效率提高。
Embed TM CPG Frits合成片段产量
引物合成
length
Frit scale 50 nmol 100 nmol 200 nmol 500 nmol 24mer 3-6OD 7-12OD 15-25OD 36-60OD 36mer 4-7OD 8-15OD 17-30OD 40-65OD 48mer 5-9OD 9-20OD 20-35OD N/A 60mer 6-10OD 10-20OD 25-40OD N/A 90mer 6-14OD 12-30OD N/A N/A
基因合成
length
Frit scale 5 nmol 10 nmol 25 nmol 50 nmol 60mer
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