标准加入法同时测定复方扶芳藤合剂中人参皂苷Rg1及人参皂苷Rb1的含量.pdf

第25卷增刊 分析测试学报 V01．25 FENXICESHI ofInstrumental 2006年11月 XUEBAO(JournalAnalysis) NOV．2006 标准加入法同时测定复方扶芳藤合剂中‘ 人参皂苷Rgl及人参皂苷Rbl的含量 覃洁萍1，叶 勇1，李 芸2，张赘赘1，张炜1 (1．广西中医学院，广西南宁530001；2．广西中医学院附属制药厂，广西南宁530023) 复方扶芳藤合剂是由红参、黄芪、扶芳藤等补益中药经提取、精制而成的13服液制剂。具有益气 补血，健脾养心等功效‘iJ。由于制剂成分复杂，一直未能找到合适的方法分析其中红参的主要皂苷类 成分的含量。曾参照有关红参、三七药材皂苷类成分的含量测定方法进行试验陋。4】，反复摸索色谱条 件，但方法准确度无法满足要求。本文采用标准加入法，建立了同时测定复方扶芳藤合剂中人参皂苷 方扶芳藤合剂的质量控制方法之一。 1 实验部分 1．1材料与仪器 1 美国Agilent100型高效液相色谱仪，配标准自动进样器，智能化柱温箱，可变波长紫外检测器， l100 二极管阵列紫外检测器，Agilent 淀机(北京医用离心机厂)。 人参皂苷Rg。及人参皂苷Rb。对照品购自中国药品生物制品检定所，复方扶芳藤合剂样品由广西 中医学院制药厂提供；乙腈(一级色潜纯，天津四友生物医学技术有限公司)；磷酸(AR级，汕头市光 华化学厂)；异丙醇(色谱纯，天津四友生物医学技术有限公司)；供试品、对照品溶液均用优级纯甲 醇配制，其余试剂皆为分析纯。 1．2 色谱条件 mmlDX150 CLC-ODS柱(6．0 色谱柱为日本岛津shim-pack mnl)，5岬；流动相A为乙腈，流动相B 为0．05％磷酸，梯度洗脱；柱温：25cc；检测波长：203rim；分析时间：80min，流速：1．0mL·rain～； 进样量：10 IxL，理论塔板数以人参皂苷Rgl峰计应不低于2．0×105。在此色谱条件下，供试品溶液色谱 图见图1。 图l 复方扶芳藤合剂样品溶液的HPLC图谱 1．人参皂苷Rgl；2．人参皂苷Rbl 1．3供试品溶液的制备 精密量取复方扶芳藤合剂样品25mL，用氯仿振摇萃取两次，每次30mL，弃去氯仿层，剩余液体 用水饱和的正丁醇分别振摇萃取5次(30、20、20、20、20mL)，合并正丁醇液，再用氨试液洗涤2 mL，第2次用80 次，第1次用100 mL，弃去氨水层，减压回收正丁醇，残渣用甲醇溶解并定容至 2mL，摇匀，用微孔滤膜(0．45斗m)滤过，取续滤液，即得。 基金项目：广西自然科学基金资助项目 一95— 第25卷 分析测试学报 增刊 1．4样品测定 取复方扶芳藤合剂样品，按“1．3”项下方法制备供试品溶液。分别准确移取同一批号供试品溶 液1．0 mL容量瓶中，其中1份不加标准混合溶液，其余各加不同量的标准混合 mL共5份于系列2．0 +4C。。分别精密吸取上述溶液各lOlL注入高效液相色谱仪，测定相应峰面积，用外推法计算出样品 中人参皂苷Rgl和人参皂苷Rbl的含量。 2结果与讨论 复方扶芳藤合剂成分复杂，由于各成分相互间的干扰不能消除，用常规的RP／HPLC方法很难分离 与测定其中的人参皂苷类成分。本文首次采用标准加入法，尝试了在无法消除干扰的情况下对复方扶 芳藤合剂中人参皂苷Rgl及人参皂苷Rbl同时进行定量分析的方法，该法加样回收率试验结果见表l。 实验结果表明本法准确可