中樞神经系统药物设计性实验.doc

中枢神经抑制药的急性毒性研究 【摘要】目的：从未知药物筛选出具有中枢神经抑制作用的目标药物，通过给小鼠腹腔注射，观察药物对中枢神经的抑制作用，并测定其LD50，以评价该药物的安全性。方法：预实验：将小鼠随机分成三组，通过腹腔注射母液，筛选出具有中枢抑制作用的目标药物，再将15只小鼠随机分成5组，确定LD0和LD100。正式实验：将45只小鼠随机分成5组，按计算好的剂量，对小鼠进行腹腔注射，观察小鼠的死亡情况，以测定LD50。结果：4号药为中枢抑制药，预实验中我们组确定抑制药的最大剂量为5mg/ml，最小剂量为2.5mg/ml，根据正式实验得到得数据经计算 LD50为3.82mg/ml。结论：受试药物的LD50为3.82mg/ml 【关键词】药物毒性；LD50 ；中枢抑制药 中枢神经系统药物是近年来销售额增长较快的药物类别， 2006 年全球市场规模达到 591 亿美元，年均增长率 9.46%，主要包括三个用药市场：抗抑郁和抗焦虑药、抗精神病药、抗癫痫药物。2005、2006 年我国中枢神经药物市场容量约为 71.96 亿元和 82.07 亿元。[2]本课题研究未知中枢抑制药物的急性毒性反应，测定LD50，分析其安全性。 1材料与方法 1.1实验动物 动物名称：小鼠 体重范围：18～22g 动物来源：广东药学院实验动物中心提供 1.2 药品 药品：中枢神经系统药物（包括兴奋药和抑制药）、生理盐水 来源：广东药学院药科学院药理系提供 1.3 实验步骤 1.3.1 预实验 确定正式实验做的药物，探索该抑制药物的0%和100%有效动物反应的剂量范围，以便正式实验时确定各组剂量。 实验过程：1、确定主题，准备好实验方案。实验课上汇报本组预实验方案，并和其他 小组讨论实验的可行性以及需要注意的问题 2、开始实验，有三组不同编号的试样药物（分别为4号、5号、6号），通过现象自己做判定得结果。取小鼠18只，称其体重，标记并且记录各自的重量；3、从18只老鼠中随机选取3只小鼠，用于母液的筛选，以0.1ml/10g的剂量，分别注射三组试样药物，观察现象并做好记录，判定哪个编号是何种药物，从中选择我们组的目标药物中枢抑制药；4、剩下的15小鼠，分为5组，每组3只小鼠，进行抑制药物的研究。母液为20mg/ml，等比进行稀释，通过二分法确定药物稀释后的浓度。根据小鼠体重以0.2ml/10g的剂量腹腔注射药物的不同浓度，在30分钟内观察各组小鼠的反应，并记录死亡小鼠的数量 5、 通过实验现象观察，得出结果，找到了我们组抑制药能引起小鼠的0%和100％有效率剂量及其所在的范围。 1.3.2 正式实验 按预计实验的实施方法进行，完成所选兴奋药物的LD50的测定。实验剂量的计算：r=(Dmin/Dmax)^(1/(n-1))根据预实验结果：Dmax=5 mg/ml及Dmin=2.50 mg∕ml，设正式实验的剂量组数n=5，剂量公比r=0.8409，则各组剂量为： 1)5 mg∕ml 2) 5*0.8409=4.20mg∕ml 3) 4.20mg∕ml*0.8409=3.54mg∕ml 4) 3.54mg∕ml*0.8409=2.97 mg∕ml 5) 2.97mg∕ml*0.8409=2.50 mg∕ml ?实验过程：?1、取小鼠45只，称重，标记，随机分为5组，使不同性别和体重能均匀分配于各组，每组9只，进行下一步实验；2、各组动物分别腹腔注射相应浓度（上述已算好的剂量）的药液0.2ml/10g，立即仔细观察，记录动物反应情况、死亡时间和数目。 3、根据实验验所得数据，计算LD50 1.3.2 实验汇报、点评、总结 1.4 数据处理方法 实验结果以小鼠是否死亡为指标，以注射浓度的对数为横坐标，以几率单位为纵坐标，通过EXCEL作图求得回归方程，从而计算出LD50。 2 结果 表1 预实验筛选药物情况 组别 编号 现象 药物 1 5 小鼠变得很暴躁，上下跳动，异常活泼，呼吸加快，最后死亡 兴奋药 2 4 小鼠变得安静嗜睡，呼吸微弱，3min后死亡 抑制药 3 6 没出现任何异常现象 生理盐水 表2 预实验的实验结果 组别 剂量（mg∕ml） 现象 死亡率