胚胎植入前染色体非整倍体检测试剂的质量控制技.PDFVIP

胚胎植入前染色体非整倍体检测试剂的质量控制技 术评价指南 （高通量测序法） (征求意见稿) 1 1.前言 随着人类辅助生殖技术的快速发展，人工授精（Artificial Insemination ，AI ）、 体外受精-胚胎移植(In Vitro Fertilizationand Embryo Transfer ，IVF-ET ）以及胞浆内单 精子注射技术(Intra-Cytoplasmic Sperm Injection ，ICSI) 已经进入了规模性的临床应用。 在体外受精形成的胚胎中，约50%存在染色体异常，可导致移植后早期胚胎丢失、 自然流产和死产，是限制辅助生殖技术成功率和有效推广的重要原因之一。胚胎植 入前遗传学筛查（Pre-implantation Genetic Screening, PGS）是在现有辅助生殖技术基 础上对植入前的胚胎细胞进行染色体非整倍体以及染色体拷贝数变异（Copy Number Variants ，CNV ）检测，以选择染色体正常的胚胎进行植入从而提高辅助生殖的成功 率，是近几年出现的胚胎植入前筛查新技术。基于该项技术的临床检测试剂盒必须 符合特定的体外诊断试剂技术要求。 本指南旨在规范申请人或企业在胚胎植入前染色体非整倍体检测试剂盒（高通 量测序法）的产品设计开发、性能评价的诊断试剂技术指标和要求，并为技术审评 部门对注册申报资料的技术审评提供参考, 不代替注册申报资料的准备及撰写的指南 和规范。 本指南主要是对企业研发、质检和产品应用关于质量控制和分析的指导性文件， 应在遵循相关法规的前提下使用本指南。 本指南仅作为技术指导性文件使用，需根据技术的发展和实际需要进行适当的 更新，本指南不具有法律强制性。 2.适用范围 本指南所述的胚胎植入前染色体非整倍体检测试剂（Preimplantation Genetic Screening, PGS）是指采用胚胎细胞进行的低深度全基因组的高通量测序法，通过对 获取的单或有限的胚胎细胞的全基因组扩增产物进行全基因高通量大规模并行基因 组测序的试剂盒，并将全基因测序结果进行统计学信息分析，从而判断胚胎的染色 体是否为非整倍体，或含有拷贝数变异（CNV ，Copy Number Variants）的片段和其 2 片段大小CNV 的检测。并不完全适用于高深度的目标片段测序法、SNP 突变测序法 和STR 位点测序法等其他高通量测序法。和本指南不相适应的其他高通量测序法， 可以参照本指南的性能评价、质量控制的要求，并通过企业参考品，证明和本指南 的要求具有实质性的等效性。 针对胚胎植入前染色体非整倍体检测的方法主要有荧光原位杂交(Fluorescence In Situ Hybridization, FISH)技术、比较基因组杂交(Comparative Genomic Hybridization, CGH)技术、单核苷酸多态性微阵列(Single Nucleotide Polymorphism-Based Array, SNP array)技术和二代测序(Next Generation Sequencing, NGS)技术。本指南并不适用于 NGS 以外的胚胎植入前检测方法学，但是参考品和对照品的设置对其它方法有一定 的借鉴作用。对于第三代单分子测序或其他测序方法，在文中并未涉及，但高通量 测序技术发展迅速，第三代单分子测序方法在企业内部参考品设置、性能评估等如 有适用的方面，可以参照执行并证实实质性的等效性。 适用疾病类型：染色体非整倍体（Chromosome Aneuploidies）以及染色体拷贝 数变异,包括22 条常染色体三体、单体、多体等，以及2 条性染色体的三体、单体、 多体等。本指南也适用于多条染色体复合非整倍体的检测，如48,XN,+9,+11 、 46,XO,+7,+13,+19,-20,-22 等。 适用人群：本指南预期用途为对高龄、反复流产或反复植入失败的夫妻进行胚 胎植入前24 条染色体非整倍体检测，检测胚胎是否有非整倍体或部分染色体拷贝数 变异，其结果仅供临床参考，不作为胚胎是否植入的唯一标准。 伦理学问题：禁止非医学目的的胚胎性别选择。检测结果报告不能显示胚胎性 别，除非有性染色体异常时可根据实际情况针对性处