贝克曼血凝仪基础知识3概要.doc

53、做凝血因子的检测时应注意什么问题？ 与常规试验相比，区别最大的是定标血浆的配置和定标方法： （1）定标血浆的配置：所有因子的定标都需要二个不同浓度的定标血浆，一个是原浓度，即1ML复溶水稀释定标血浆干粉；另一个是在原浓度的基础上再作1：15稀释的低浓度定标血浆（20微升原浓度定标血浆，加300微升水），按照机器的要求放置； （2）定标血浆的参数输入后，定标的选项不在通常的Calibration中，而是直接将定标血浆、试剂、标本按机器要求放好后，按RUN即可。机器会先定标，然后作标本。 （3）二个浓度的定标血浆做出三条定标曲线。 （4）一旦机器中有定标曲线，下次再做该因子时，不放定标血浆机器也照做标本。 （5）由于因子的活性不稳定，所以最好在采血后二小时内完成试验。 （6）由于因子的活性不稳定，所以下次定标的时间最好不要超过5天。 54、因子检测的成本较高，如何才能节省成本？ 批量做才能节省成本。需要注意的是病人血浆不能放置在4℃冰箱，必须放置在-20℃保存二周，-60℃保存三个月。解冻时要放置在37℃水浴迅速解冻，否则因子的活性会大大降低，从而得出假阳性结果。 55、因子检测如何实行质量控制？ 完整的质量控制推荐同时使用正常对照和异常对照。正常对照和特殊测试对照水平1和2(IL Coagulation)以及分析用正常和异常参考血浆(ELECTRA)均被设计在本程序中。每个实验室均应建立他们自己的平均值和标准差,并必须建立一套质量控制程序来监测实验室的测试。根据良好实验室操作规程(GLP)的要求,质量控制测试至少应该在每8小时内进行一次。 56、因子检测对标本血浆的要求是什么？ 过渡溶血、黄疸以及高脂血症的样品不要使用。 57、乏因子血浆在配置时应注意什么问题？ （1）将每管中的冻干粉溶解于1毫升NCCLS标准的II型水或相近的水中3。塞紧塞子,并缓慢蜗旋混匀。确保本品完全溶解,并将血浆置于15-25℃,30min。用前倒转几次,混匀。不要震荡,并避免形成泡沫。 （2）溶解后的稳定性:在原始储存管中于2-8℃下稳定24小时,或者在ACL Futura?/ACL高级系统和ACL TOPTM中,可以在15℃下储存24小时。 （3）本品最好的储存方法为:从系统中移出的乏因子X血浆,保存在原保存管内,于2-8℃放置。 58、vWF抗原检测的原理是什么？ 免疫比浊法： 向待检血浆中加入包被抗vWF的单克隆抗体的乳胶试剂，血浆中的vWF抗原与之结合形成大分子物质。波长405nm投射比浊测定，透光量与抗原含量成反比。 59、vWF抗原检测对标本血浆的要求如何？ 当血色素在80mg/dL、胆红素10mg/dL、甘油三酯1000mg/dL时，不影响其在ACL-Futura/ACL-Advanve系统上的结果； 当血色素在90mg/dL、胆红素15mg/dL、甘油三酯750mg/dL时，不影响其在ACL-Family系统上的结果； 类风湿因子存在可能是检测结果过高。 当血色素在120mg/dL、胆红素14mg/dL、甘油三酯1500mg/dL时，类风湿因子750IU/mL时，不影响其在ACL-TOP系统上的结果。 60、vWF活性的检测原理是什么？ vWF活性检测是利用乳胶颗粒增加免疫浊度测定法，测定血浆中的vWF活性。由于乳胶试剂凝集使浊度增加，测定增加的浊度可检测vWF活性。特异性抗vWF单克隆抗体被吸附到乳胶颗粒上，并定向于血小板的结合位点vWF(糖蛋白IB受体)上，从而与患者血浆中的vWF反应，凝集的程度与样本中vWF活性呈正比，通过测定凝集引起的传输光光线的减少可确定vWF活性。 61、vWF抗原检测与vWF活性的检测在临床上有何意义？ 血管性血友病（VWD）在我国是最常见的先天性出血性疾病，对VWD的实验室诊断要求进行多个特异性检验。测定并比较血浆中的血管性血友病因子抗原（VWF：Ag）VWF活性和Ⅷ因子水平有助于区别VWF数量上的缺陷（1型或3型）或质量上的缺陷（2型）,从而对不同类型的VWD进行诊断。 当得到的VWF：Ag水平极低或检测不出来时，预计是3型VWD。如果得到的VWF：Ag水平是中等甚至是正常时，必须测定VWF活性和Ⅷ因子，并于VWF：Ag结果比较，如果这三个值在正常范围内，可以排除VWD和血友病A。如果至少存在一个参数为异常低值，必须计算VWF活性/ VWF：Ag和Ⅷ因子/ VWF：Ag，如果这二个比值都接近1（有些作者建议以0.7为临界值），诊断为1型VWD。 62、在做VWF抗原检测和活性检测时应注意哪些问题？ （1）在结果判定上要注意，VWF属于体内的急性时相反应物，当机体处于应激、妊娠，炎症等情况下会影响的血浆浓度，所以利用取自不同时间的其它样本进行重复分析