2012年第廿三屆國際生物奧林匹亞競賽--實驗試題(I).pdfVIP

2012 年第廿三屆國際生物奧林匹亞競賽 --實驗試題(I) 中華民國生物奧林匹亞競賽代表團 實驗一 ：細胞及分子生物學 總分 ：100 分 總操作時間 ：90 分鐘 【實驗材料與儀器 】 實驗材料與儀器 數量 單位 限制酶 RE1 (Ndel) ( 置於冰上 ) 4 μl 管 限制酶 RE2 (EcoRl) (置於冰上 ) 4 μl 管 DNA 待測樣品溶於限制酶緩衝液中 (標示 ：T) (置於冰上 ) 10 μl x 4 管 miliQ 純水 (標示 ：W) 1 管 DNA 電泳槽和電源供應器 1 組 微量分注器和分注器吸管 尖 (p10, p100) 2 件 計時器 1 個 尺標 DNA (作為樣品大小參考標準 ，L1 適用於 100bp 差異 ； 2 管 L2 適用於 1kbp 差異) (置於冰上 ) DNA 加注染料 (藍色 ) 1 管 預先已做好的電泳膠 ( 已放在電泳緩衝液 running buffer 中) 1 片 大培養皿 (裝盛電泳膠片送去照相時使用 ) 1 個 標記有你的國家代號的卡片 ：招呼協助時使用 1 個 圓形浮水離心管座(標記有你的國家代號 ) 1 個 微量離心管 1 組 37 oC 水浴槽 (使用指定的一個 ) 1 個 膠片照相裝 置 (使用指定的一個 ) 1 個 第一部分 : 以限制酶切割 DNA 片段後推定基因切位圖 (100 分) 【背景介紹 】 基因的限制酶切位圖常被使用於分析 DNA 片段的順序和內容 。一個 DNA 片段經限制酶 切割 ，並透過電泳分離後會顯示此 DNA 片段特有的模式 。此技術在選殖基因 、研究基 因功能和調控 、尋找疾病相關基因和疾病診斷 ，及法醫分析上均為有用的工具 。 A 部分 ：確認在一選殖質體上含有插入的人類 DNA 片段 (80 分) 你要利用限制酶切位分析法去確認一個人類 DNA 片段 “X” (長度大約是 760 base pairs) - 59 - 科學教育月刊 第 386 期 中華民國 105 年 3月 是否已被插 入到一個選殖質體 “V” 內 (V 是環狀 DNA ，長度大約是 2570 base pairs) 。 你要先設計