菌种的甘油冷冻保存法.pdfVIP

( ) ( ) 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　山西医科大学学报 J Shanxi Med Univ 2000 , 31 4 　 3·82 · ( ) 文章编号 : 　1007 - 6611 2000 04 - 0382 - 01 菌种的甘油冷冻保存法 ( 山西医科大学微生物学与免疫学教研室 , 　太原 　030001) 郭淑清 , 　田　锋 　 摘要 : 　以体积分数为 0 8 的甘油生理盐水为保存液 ,在20 ℃保存军团菌 、葡萄球菌等 35 个菌株 。观察 9 年 ,效果良好 。 关键词 : 　菌种保存 ; 　甘油冷冻保存法 中图分类号 : 　Q93 - 336 　　文献标识码 : 　B 　　“菌种”一词有两个不同的概念 。一是细菌类微生物的 分别取样培养 ,全部生长良好 ,性状与保存前一致 。 ( ) 种 species ,是生物分类学名称之一 。另一为我国的习惯用 在基础微生物学 、医学微生物学 、卫生微生物学 、兽医微 法 ,指用于实验室操作的某些菌株 ,相当于西方实验室中的 生物学 、食品微生物学 、工业微生物学 、农业微生物学 、环境 stock cultures ,本文“菌种”系后一含义 。 科学 、分子生物学 、毒理学 、酶学 、疫苗制备 、药品生产等等领 菌种是所有与微生物有关的专业教学 、科研 、质控 、以至 域 ,都需应用储备的标准菌株 、参考菌株 、特殊菌株 ,并常需 生产的必要条件 。自从上一世纪微生物学创始以来 ,菌种保 保存新分离菌株 。已报告的菌种保存方法有多种 ,如半固体 存便一直是一项重要的实验技术 ,并不断得到发展 。笔者近 培养基普通冰箱保存法[ 1 ] 、液体石蜡保存法[ 1 ] 、脱脂牛乳低 年来试用我校谢皙子教授从美国南卡罗来纳大学医学院引 温保存法[ 1 ] 、脱纤维动物血液低温保存法[ 2 ] , 虽经不同实验 进的甘油冷冻菌种保存法 ,效果良好 。报告如下 。 室应用 ,但效果均不满意 。Flosdorf 与 Mudd 创立的冷冻真 1 　材料和方法 空干燥法经历近一个世纪 ,技术有所改进 ,是迄今最佳的菌 11 　实验菌株 　不同种 、型军团菌共 23 株 ,美国南卡罗来 种保存法[ 3 ] ,但所需专用仪器一般实验室难以配备 。我室历 纳医学院惠赠 ;金黄色葡萄球菌 、枯草杆菌 、绿脓杆菌 、痢疾 来沿用普通冰箱保存半固体培养物菌种 。该法虽然条件要 ( ) 杆菌 、伤寒杆菌 TO 、TH 、甲型副伤寒杆菌 、变形杆菌 、产碱 求不高 ,然而必须每月传代一次 ,操作包括无菌器材准备 、实 杆菌 、大肠杆菌 、炭疽杆菌 、卡他球菌共 12 株 ,均购 自中国生 验动物血液采集 、培养基制作及分装 、细菌接种及孵育、旧菌 物制品药品检定所菌种中心 。 种管的灭菌及清洗等等 ,消耗大量人力物力 ,更严重的问题 12 　液体培养基 　按不同细菌的营养要求制备 。 是频繁的传代接种容易导致杂菌污染及菌种变异 。甘油冷 13 　菌种保存液 ———体积分数为 0 8 的甘油生理盐水 : 　 冻保存法则可免除上述缺点