大肠杆菌周质蛋白提取工艺的研究.PDF

28 卷 6 期 生 物 学 杂 志 Vol. 28 No. 6 20 11 年 12 月 JOURNAL OF BIOLOGY Dec ，2011 doi颐10. 3969/j . issn.2095-1736.2011. 06.095 大肠杆菌周质蛋白提取工艺的研究 1 2 2 1 李振国 ，徐明波 ，牛 罡 ，姚文兵 ， ，北京 1. 中国药科大学 生命科学与技术学院 南京 210009 ；2. 北京双鹭药业股份有限公司 100041 ） 、 、渗透压休克法作 摘 要：研究了精氨酸缓冲液在不同浓 pH 值及提取时间下的周质蛋白提取率，并以溶菌酶法 为对比。结果表明浓 0.4 mol/L ，pH 值8.0，提取时间为45 min 时，周质目的蛋白达到 0.89 mg/g 湿菌，相比其他方 法，周质蛋白提取率分别提高93%、187%。实验得到一种高效、方便的大肠杆菌周质蛋白提取工艺，为周质表达的重 蛋白大规模生产奠定了基础。 ： ； 关键词 周质蛋白 提取；大肠杆菌 ： ： ： 中图分类号 Q81 文献标识码 B 文章编号 2095-1736（20 11 ）06-0095-03 Study on extraction of periplasmic proteins in E. coli 1 2 2 1 LI Zhen-guo ，XU Ming-bo ，NIU Gang ，YAO Wen-bing （1. School of Life Science and Technology ，China Pharmaceutical University ，Nanjing 210009 ；2. Pekin Shuanglu Pharmacy Company ，Beijing 100041 ，China ） Abstract: To investigate the extraction and release technology of periplasmic protein in E. coli ，the recovery of periplasmic proteins using the Arginine buffer under different concentrations ，pH and extracting time was studied. The recovery was com- pared with that of the lysozyme method and osmotic shock method. Results showed that under the condition of concentration of arginine 0.4 mol/L ，pH8.0 ，extracting time 45 min ，the target proteins